[发明专利]用玉米素核苷测定不同茬高多花黑麦草再生能力的方法

摘要

本发明涉及一种用玉米素核苷测定不同茬高多花黑麦草再生能力的方法，培植不同茬高多花黑麦草，用酶联免疫法测量新生叶片中玉米素核苷，通过比较新生叶片中玉米素核苷含量，含量大者说明其再生能力更强。本发明能有效测定不同茬高多花黑麦草再生能力的强弱，对研究牧草的再生具有重要的意义；本发明的测量方法简单，易于操作，便于广泛应用，并且实用性强。

主权项

1.一种用玉米素核苷测定不同茬高多花黑麦草再生能力的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一：选取生长一致的2周龄多花黑麦草108株，以每盆6株植入18个相同的花盆内，花盆内装有混合基质，按重量份数比混合基质由3份蛭石和1份草炭土组成，在平均温度为25℃，每天平均光照为8小时条件下，培养70天后，将这18盆多花黑麦草随机分为2组，每组9盆，即试验组a和试验组b，再把试验组a和试验组b分别随机分为a1、a2、a3亚组和b1、b2、b3亚组，每亚组3盆；剪去试验组a和试验组b中的多花黑麦草叶片，a组和b组分别留不同茬高；直接取试验亚组a1和b1，或者将试验组a和b中已剪去叶的多花黑麦草继续培养并剪叶后取试验亚组a1和b1，培养和剪叶方法为日均温度20℃条件下培养，每隔6天剪掉叶片一次，连续剪叶N次，a组和b组每次剪过之后分别与之前留相同茬高；将剪叶后的试验亚组a1和b1的根与茬分离，得到多花黑麦草茬，将多花黑麦草茬放入75℃的烘干箱内，烘干，得到每盆多花黑麦草茬烘干物，然后用电子天平测每盆多花黑麦草茬烘干物质量，分别得到试验亚组a1和试验亚组b1的茬生物量Ra和Rb，备用；步骤二：将试验亚组a2、a3和b2、b3中多花黑麦草在温度为20-25℃条件下培养，6天后，在步骤一所留茬高的位置上剪掉新生的多花黑麦草叶片，得到多花黑麦草新生叶，将试验亚组a2和b2中的多花黑麦草新生叶送入75℃的烘干箱内，烘干，得到每盆多花黑麦草新生叶烘干物，然后用电子天平测每盆多花黑麦草新生叶烘干物质量，分别得到试验亚组a2和b2新生叶生物量La和Lb，备用；步骤三：利用测得的多花黑麦草茬生物量Ra、Rb，新生叶生物量La、Lb，根据公式RIa =×100%和RIb =×100%计算多花黑麦草再生能力指数RIa和RIb的大小，备用；步骤四：用酶联免疫法测量步骤二中的试验亚组a3和b3新生叶片的玉米素核苷含量，得到试验亚组a3和b3新生叶玉米素核苷含量Za和Zb，备用；步骤五：比较RIa和RIb的大小或Za和Zb的大小，值较大者就说明该组黑麦草的再生能力较强；如果当RIa大于RIb时，Za大于Zb；当RIa小于RIb时，Za小于Zb，则说明用玉米素核苷测定不同茬高多花黑麦草再生能力的方法为有效方法。