[发明专利]一种利用石英晶体微天平检测可卡因的方法

摘要

本发明公开了一种利用石英晶体微天平检测可卡因的方法，该方法为：一、制备表面自组装DNA的QCM芯片；二、封闭芯片表面的多余位点；三、制备引发剂标记的DNA溶液；四、采用适配体DNA溶液和引发剂标记的DNA溶液共同孵育封闭后的芯片，装入石英晶体微天平的反应器中，通入缓冲液，读取频率F1；五、取出芯片进行表面引发聚合反应；六、将表面引发聚合反应后的芯片置于反应器中，通入缓冲液，读取频率F2，再通入检测物，读取频率F3，计算F2与F1及F2与F3的差值ΔF′和ΔF″，当ΔF″/ΔF′≥30%时，判定检测物中含有可卡因。本发明采用石英晶体微天平为检测工具，具有实时检测等优势。

主权项

一种利用石英晶体微天平检测可卡因的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：步骤一、配制DNA浓度为0.2μM的DNA组装液，然后采用DNA组装液孵育清洗干净的QCM芯片，得到表面自组装DNA的QCM芯片；所述DNA为巯基修饰DNA，DNA序列为：5’‑TCA CAG ATG AGT AAA AAAAAA AAA‑3’；步骤二、采用浓度为2μM的巯基聚乙二醇的乙醇溶液孵育步骤一中所述表面自组装DNA的QCM芯片使芯片表面的多余位点封闭；步骤三、制备引发剂标记的DNA溶液；步骤四、采用适配体DNA溶液和步骤三中所述引发剂标记的DNA溶液共同孵育步骤二中封闭后的QCM芯片，用缓冲溶液冲洗孵育后的芯片表面，得到固定有适配体DNA的QCM芯片；将所述固定有适配体DNA的QCM芯片装入石英晶体微天平的反应器中，然后向反应器中通入缓冲液，待基线平稳后，读取石英晶体微天平监测到的频率F1；所述适配体DNA的序列为ACT CAT CTG TGA ATC TCG GGA GAC AAG GAT AAATCC TTC AAT GAA GTG GGT CTC CC；所述缓冲液为0.1M pH值为7.0的PBS缓冲液；步骤五、将步骤四中装入石英晶体微天平的反应器中的QCM芯片取出，氮气吹干后置于表面引发聚合反应液中，并将整个反应体系移至手套箱中，室温下反应2h～4h后将QCM芯片从表面引发聚合反应液中取出，用PBS溶液冲洗QCM芯片，然后用氮气吹干；步骤六、将步骤五中吹干后的QCM芯片装入石英晶体微天平的反应器中，然后向反应器中通入缓冲液，待基线平稳后，读取石英晶体微天平监测到的频率F2，再向反应器中通入检测物，待石英晶体微天平频率变化曲线平稳后读取监测到的频率F3，计算频率F2和步骤四中所述频率F1的差值ΔF′，频率F2和频率F3的差值ΔF″，当ΔF″/ΔF′≥30%时判定检测物 中含有可卡因；所述缓冲液为0.1M pH值为7.0的PBS缓冲液。