[发明专利]一种有效提高苦荞麦总黄酮含量的组培方法

摘要

本发明公开了一种有效提高苦荞麦总黄酮含量的组培方法，该方法采用前体饲喂技术，通过在荞麦细胞悬浮培养中添加黄酮类物质的代谢中间产物乙酸钠或酵母提取物，不仅能显著提高荞麦培养细胞中的总黄酮含量，而且还对其组培物的生物量增殖产生明显的促进作用。本发明可为进一步大规模开展荞麦植物次生代谢产物的生产奠定基础，从而可更好的实现荞麦植物有效组份的快速生产，同时也可为进一步研究荞麦植物中黄酮次生代谢的分子调控提供重要的技术支持。

主权项

一种有效提高苦荞麦总黄酮含量的组培方法，其特征在于包括如下步骤：(1) 外植体的处理：选取生长健康和无病虫害的苦荞茎段作为外植体，并进行消毒处理；(2) 愈伤组织的诱导培养：取消毒后的外植体，吸干表面的水分后切成0.5cm～1.5cm的长度，然后接入愈伤组织诱导培养基MS+6‑BA 0.1～2.0mg•L+2，4‑D 1～6mg•L+IAA 0～1mg•L+蔗糖20～60 g•L‑1+琼脂5.0～7.0 g·L‑1中进行培养，培养条件为pH值5.5～6.8、每天光照8～16小时、光照强度1000～2000lx、培养温度18～28℃；(3) 愈伤组织的悬浮培养：切取生长15～25天的愈伤组织，以10～50 g·L‑1的接种量接入到添加有前体饲喂物的液体培养基MS+6‑BA1.0～2.0mg•L‑1+NAA0.1～0.5 mg•L‑1+蔗糖20～60 g•L‑1+Vc 100～300 mg •L‑1中进行悬浮培养，培养条件为pH值5.5～6.5，培养温度18～24°C、每天光照8～12小时、光照强度600～1000 lx，摇床转速为120～140r/min，所述前体饲喂物为乙酸钠或酵母提取物，乙酸钠的加入量为1～10 mg／L，酵母提取物的加入量为0.5～5g/L。