[发明专利]一种基于柑橘全爪螨几丁质基因的RNA干扰载体制备方法有效
申请号: | 201210492357.7 | 申请日: | 2012-11-28 |
公开(公告)号: | CN103045644A | 公开(公告)日: | 2013-04-17 |
发明(设计)人: | 冉春;张云飞;刘浩强;陈飞;李鸿筠;李俊丽;李晓姣;岳建书 | 申请(专利权)人: | 冉春 |
主分类号: | C12N15/84 | 分类号: | C12N15/84;C12N15/66;A01H5/00 |
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地址: | 400712 重*** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | 本发明公开了一种基于柑橘全爪螨几丁质基因的RNA干扰载体制备及应用方法,通过BLAST搜索,从柑橘全爪螨转录组数据库鉴定出13条几丁质酶基因,从中挑选Unigene7021进行真实性检测,然后在NCBI上搜索比对保守序列,合成对应的dsRNA,将正、反向几丁质酶目的片段先后插入到载体内含子两端,从而构成反向互补发卡结构的RNAi载体“PFGC-7021P1F1/7021P2F2”,将构建的载体转入农杆菌感受态中,进而将农杆菌侵染植株获得转基因柑橘材料。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 柑橘 全爪螨 几丁质 基因 rna 干扰 载体 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种一种基于柑橘全爪螨几丁质基因的RNA干扰载体制备方法,其特征在于,通过BLAST搜索,从柑橘全爪螨转录组数据库鉴定出13条几丁质酶基因,从中挑选Unigene7021进行真实性检测,然后在NCBI上搜索比对保守序列,合成对应的dsRNA,将正、反向几丁质酶目的片段先后插入到载体内含子两端,从而构成反向互补发卡结构的RNAi载体“PFGC‑7021P1F1/7021P2F2”,将构建的载体转入农杆菌感受态中,进而将农杆菌侵染植株获得转基因柑橘材料。
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