[发明专利]一种具有调节血糖活性乌饭树多糖的提取纯化方法

摘要

一种具有调节血糖活性乌饭树多糖的提取纯化方法，属于功能性植物多糖精深加工技术领域。本发明工艺步骤是：以乌饭树树叶为原料，经过粉碎、水提、醇沉，再经过大孔树脂和凝胶色谱分离纯化，最后用胰岛β-细胞膜色谱柱验证活性，得到具有调节血糖活性的乌饭树多糖。本发明工艺设计科学合理，能有效的分离纯化具有调节血糖活性的多糖，提高了乌饭树资源的开发利用，为植物多糖的开发提供了依据。

主权项

一种具有调节血糖活性乌饭树多糖的提取纯化方法，其特征是以乌饭树树叶为原料，经过粉碎、热水水提、乙醇沉淀，再经过大孔树脂和凝胶色谱分离纯化，最后用胰岛β‑细胞膜色谱柱验证活性，得到具有调节血糖活性的乌饭树多糖；具体工艺如下：(1)原料粉碎：乌饭树树叶干燥，粉碎，过60‑80目筛网，得到树叶粉末；(2)热水提取：乌饭树树叶粉末加水，料液比控制在1∶40‑1∶50，pH调节至9.0‑9.5，温度调节至60‑65℃，浸提时间为2‑3h，4000r/min离心15min，取上清液，旋转蒸发浓缩得到浓缩液A；(3)乙醇沉淀：浓缩液A与适量乙醇混合，调节至混合液中乙醇纯度为75‑85％，沉淀时间为6‑7h，4000r/min离心15min，取沉淀，加水复溶，得到浓缩液B；(4)大孔树脂纯化：浓缩液B上大孔吸附树脂，先用2‑3倍柱体积的去离子水洗脱，弃去洗脱液，再用3‑5倍柱体积的体积浓度为95％的酒精洗脱，收集洗脱液，浓缩至酒精含量不超过5％，得到浓缩液C；(5)凝胶色谱纯化：浓缩液上凝胶柱，收集分子量在80‑100KDa范围内的洗脱液，浓缩得到浓缩液D；(6)胰岛β‑细胞膜色谱柱验证活性：以处理好的载体细胞膜作为胰岛β‑细胞膜色谱柱的固定相，流速为0.2mL/min，柱温为37℃，流动相为硫酸铵缓冲液。