[发明专利]一种蜂花粉核酸的提取方法

摘要

本发明涉及一种蜂花粉核酸的提取方法，该方法包括以下步骤：蜂花粉壁破碎处理、水浴、冷却、提取、重复提取、纯化后得到蜂花粉核酸。本发明提取原料易得，因此处理成本低；工艺简单，并且在提取液配制中不添加Tris-HCl，因此，有效避免了Tris等有毒有害物质的残留；经检测，本发明所得蜂花粉核酸纯度高，本发明得到的蜂花粉核酸可应用于食品及药品，对蜂花粉核酸的广泛应用开辟了新途径。

主权项

一种蜂花粉核酸的提取方法，其特征在于该方法包括以下工艺步骤： （1）蜂花粉壁破碎处理：蜂花粉中加入溶剂，其质量体积比为1:3~5，溶剂为提取液和体积比为23～25:1的氯仿/异戊醇混合液按等体积比混合，提取液为20 mmol/LEDTA、质量体积比为2%CTAB，1.4 mol/L NaCl混合而成，在0～25℃温度下浸泡12～24h后，在匀浆机中进行匀质破壁，匀浆机转速为18000～24000转/min，匀质2~3次，每次5~8min；（2）水浴：在步骤（1）获得的匀质液中，再加入5~10倍的提取液，于55～70℃条件下水浴0.5～1.5h；（3）提取：冷却至室温，再加入等体积的体积比为23～25:1的氯仿/异戊醇，振荡8~10min，在0~4℃、4000～12000r/min、离心管条件下离心分离8~10min，得提取液；（4）重复提取：将步骤（3）所得固相重复步骤（3）2～4次；（5）纯化：合并步骤（3）和步骤（4）获得的提取液，在合并提取液中加入其体积2/3的0~4℃的异丙醇，混匀后在‑20℃放置2h以上，弃去液相，沉淀物用体积比为75%的乙醇洗涤2～3次，去除乙醇，自然风干，得蜂花粉核酸。