[发明专利]一种从发酵液中分离纯化WF11899A的方法有效
| 申请号： | 201210514096.4 | 申请日： | 2012-12-04 |
| 公开（公告）号： | CN103848900A | 公开（公告）日： | 2014-06-11 |
| 发明（设计）人： | 芦现杰;胡海峰;朱宝泉;张长清 | 申请（专利权）人： | 上海医药工业研究院;中国医药工业研究总院 |
| 主分类号： | C07K7/56 | 分类号： | C07K7/56;C07K1/20 |
| 代理公司： | 上海弼兴律师事务所 31283 | 代理人： | 朱水平;沈利 |
| 地址： | 200040 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种从发酵液中分离纯化WF11899A的方法，其包含步骤：（1）用C1～C4的醇或酮浸泡含WF11899A的发酵液0.5～3h后，固液分离；（2）去除液体部分中的醇或酮后，过大孔吸附树脂，以甲醇水溶液洗脱，收集洗脱液减压浓缩，得浓缩液；（3）将浓缩液通过聚苯乙烯反相色谱柱，以乙腈、磷酸二氢铵和水的混合溶液洗脱，HPLC跟踪检测，分段收集WF11899A纯度大于90%的洗脱液，并减压浓缩得浓缩液；（4）将步骤（3）所得的浓缩液上样于聚苯乙烯反相色谱柱，用纯水冲洗脱盐，然后以纯甲醇洗脱，所得洗脱液即为含有WF11899A的洗脱液。本发明方法对WF11899A的提取纯度较高，收率高，纯化工艺简单，为从发酵液中分离纯化WF11899A提供了一种高效率低成本的工业化方法。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 发酵 分离 纯化 wf11899a 方法 | ||
【主权项】：
一种从发酵液中分离纯化WF11899A的方法，其特征在于，其包括如下步骤：（1）用C1～C4的醇或酮浸泡含WF11899A的发酵液0.5～3h后，将发酵液进行固液分离，取液体部分；所述的C1～C4的醇或酮与含WF11899A的发酵液的体积比为1︰2～3︰1；（2）去除步骤（1）得到的液体部分中的C1～C4的醇或酮后，过大孔吸附树脂，以甲醇水溶液洗脱，收集洗脱液，并减压浓缩，得浓缩液；（3）将步骤（2）所得的浓缩液通过聚苯乙烯反相色谱柱，以乙腈、磷酸二氢铵和水的混合溶液洗脱，对洗脱过程进行HPLC跟踪检测，分段收集WF11899A纯度大于90%的洗脱液，并减压浓缩，得浓缩液；在所述的乙腈、磷酸二氢铵和水的混合溶液中，乙腈的体积百分比为40%～60%，磷酸二氢铵的质量百分比为0.4%～0.6%；（4）将步骤（3）所得的浓缩液上样于聚苯乙烯反相色谱柱，用纯水冲洗脱盐，然后以纯甲醇洗脱，所得洗脱液即为含有WF11899A的洗脱液。
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