[发明专利]朝鲜蓟的培育方法

摘要

朝鲜蓟的培育方法，包括如下步骤：外植体的选取、外植体的消毒、丛生芽的诱导、丛生芽的增殖、生根培养、试管小苗的驯化和移栽，成活率达90%以上。本发明具有如下优点：本技术利用朝鲜蓟易分蘖的特点，直接从大田采取农艺性状好、无病毒的朝鲜蓟分蘖茎尖为外植体，利用茎尖不定芽建立朝鲜蓟高效、稳定的再生体系。不仅可以生产大量脱毒苗，选育符合商品要求、适合本地栽培的优良品质，对朝鲜蓟这种外来引进作物的本地化进程以及抗病性和抗逆性有很强的优势，以实现朝鲜蓟标准化、规模化生产。而且，本技术方法简单、成本低、容易实施，是一种高效、稳定的种苗繁育方法。

主权项

朝鲜蓟的培育方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）、外植体的选取：每年的10月到翌年4月都可在大田取样，采农艺性状好、无病毒的朝鲜蓟宿根苗或分蘖芽做外植体；（2）、外植体的消毒：将从大田收集的外植体材料用流水冲洗干净，先剪掉大叶片，再用刀片削去茎尖周围的叶片和组织，留取3～4cm的茎尖段洗净后转至无菌室；在超净工作台上，先用75％酒精处理10s，清洗2～3次后，再用0.1％升汞处理8～10min，用无菌水冲洗4～5次后，置于消毒滤纸上吸干水分后备用；（3）、丛生芽的诱导：将消毒后的茎尖段切成0.5cm的部分接入芽诱导培养基MS+1 mg/L 6–BA+0.5 mg/L NAA+56.5 mg/L Na2HPO4+100 mg/L肌醇+100mg/L L‑酪氨酸中；3～5天后，切口处膨大，茎尖开始变绿、伸长；10～15天后，腋芽开始萌发、伸长；30天后，形成至少8个叶片的丛生芽；（4）、丛生芽的增殖：将诱导出的丛生芽切成带2～3片叶的芽块，剔除褐化的组织，并转入增殖培养基MS+2 mg/L 6–BA+56.5 mg/L Na2HPO4+100 mg/L肌醇+100mg/L L‑酪氨酸中；7天后，腋芽开始分化；15天后，即可形成丛生芽，平均20天继代1次，增殖系数为6.2；（5）、生根培养：将长势好、叶色浓绿、苗高2～3 cm的丛生芽切成带3～4片叶的试管小苗，移至生根培养基1/2MS+1.0 mg/L NAA+1.0 mg/L β–CD+100 mg/L肌醇上，7天后，茎段基部根原基突起；15天后，从根原基长出新的不定根，生根率可达99.3%；（6）、试管小苗的驯化和移栽：当幼苗的根长达0.5～1.0 厘米时进行移栽，根太长反而易遭损伤不利生长，移栽前在温室内开瓶炼苗2～3 天，午后和傍晚喷水，以便提高炼苗的适应能力；小苗转移到苗床前，用自来水把根系上的培养基冲洗干净，同时用1000倍甲基托布津或多菌灵浸泡小苗根部30分钟，随后放置于通风阴凉处晾干水分至根系发白变软，再栽入已准备好的基质中，基质为质量比1∶1∶1的蛭石、珍珠岩、细沙的混合物；栽后必须通风、保湿，温度太高时揭开膜两端降温；待10～l5 天后有效叶达3片以上时移栽到大田，成活率达90 %以上。