[发明专利]SYBR Green 荧光染料DNA定量检测方法和试剂盒

摘要

本发明涉及DNA定量检测方法和检测试剂盒。本发明建立了SYBR Green I荧光染料法对DNA定量的条件，得到了该方法的线性范围和灵敏度，可以快速、准确的得到DNA样品的精确含量。本发明还构建制备了质粒分子和基因组DNA标准品，采用数码PCR法对两种DNA标准品进行准确定量，利用该标准质粒或基因组DNA进行梯度稀释，得到SYBR Green I荧光染料法定量DNA的标准曲线，根据标准曲线得到待测DNA样品的准确含量。

主权项

一种SYBR Green荧光染料DNA定量检测方法，步骤为： 1）将待测样品稀释至DNA浓度为0.01～1ng/μL，与荧光染料混匀，用酶标仪读取所得到的荧光信号强度值； 2）将标准品进行梯度稀释，得到4～8个DNA浓度的稀释液；取每一种浓度的标准品稀释液分别与荧光染料混匀后，用酶标仪分别读取每一种浓度所得到的荧光信号强度值； 3）根据步骤2）得到的不同浓度DNA标准品的荧光强度值绘制标准曲线，根据此标准曲线计算待测样品DNA的浓度； 其特征为：所用的标准品为用数字PCR法准确定量的环状质粒分子DNA或基因组DNA；荧光染料是SYBR Green I。