[发明专利]一种共表达UPR关键基因和下游靶基因增强葡萄糖氧化酶分泌的方法有效
| 申请号： | 201210552718.2 | 申请日： | 2012-12-19 |
| 公开（公告）号： | CN102994541A | 公开（公告）日： | 2013-03-27 |
| 发明（设计）人： | 陈坚;顾磊;张娟;堵国成;沈伊娜;闻一凡;李梦洁;李婷;丁雪 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N15/81 | 分类号： | C12N15/81;C12N1/19;C12N9/04;C12R1/84;C12R1/865 |
| 代理公司： | 北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙) 11419 | 代理人： | 何自刚;王玉松 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种共表达UPR关键基因和下游靶基因增强分泌表达葡萄糖氧化酶的方法，属于基因工程技术领域。本发明采用基因重组技术将毕赤酵母UPR关键基因Haclp与下游靶基因Pdi1、Ero1、Lhs1、Kar2、Sil1分别克隆连接到毕赤酵母表达载体pPICZα与pPIC3.5K，并转化入Pichia pastoris GS115-pPIC9K-GOD保藏编号为CCTCC NO：M 2012266的菌株中，经筛选鉴定得到一株较原有菌株增强分泌表达葡萄糖氧化酶的菌株。该菌株表达的葡萄糖氧化酶在3L发酵罐上酶活585U/mL。这为葡萄糖氧化酶的大规模生产奠定了良好的基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 表达 upr 关键 基因 下游 增强 葡萄糖 氧化酶 分泌 方法 | ||
【主权项】：
一种共表达UPR关键基因和下游靶基因增强葡萄糖氧化酶分泌的方法，其特征在于，是将毕赤酵母UPR关键基因Haclp连接到毕赤酵母表达载体pPICZα上，将其下游靶基因连接到表达载体pPIC3.5K上，并将下游靶基因表达质粒与Haclp表达质粒一起转化入Pichia pastoris GS115‑pPIC9K‑GOD中得到的基因工程菌。
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