[发明专利]鸡肠道抗菌肽的提取方法

摘要

本发明公开了一种鸡肠道抗菌肽的提取方法，它包括如下具体步骤：（1）取肠黏膜和菌株；(2)抗菌肽粗制品的制备；(3)抗菌肽粗制品的纯化。该提取方法简单易懂，提取的抗菌肽广泛存在于生物体中，具有抗菌、抗病毒、杀寄生虫、抗肿瘤等活性，是先天性免疫系统极其重要的组成成分，可以抵抗外来微生物的入侵。

主权项

一种鸡肠道抗菌肽的提取方法，其特征在于：它包括如下具体步骤：一、取肠黏膜和菌株：取某鸡场饲养的60日龄三黄鸡的鸡肠黏膜、大肠杆菌菌株；二、抗菌肽粗制品的制备：取新鲜鸡肠黏膜用灭菌生理盐水冲洗，经组织捣碎机捣碎后按1：1比例加入5%乙酸，100℃水浴10min，迅速冷却后4℃、8000r/min离心30min，取上清超声波裂解30s，4℃搅拌浸提24h后重复上述离心过程，取上清，调整pH7.0值，再次离心，上清液冷冻干燥；三、抗菌肽粗制品的纯化：将上清液上样于SephadexG‑50过滤层析柱，用0.1mol/L乙酸钠溶液，pH7.0进行洗脱，恒流泵的速度为3×1，紫外检测仪检测其在280nm处的吸光值，记录仪记录，量程200mV，纸速度为6cm/h，自动部分收集器收集，每管约2ml，检测各收集管洗脱液对大肠杆菌的抑菌活性，收集有抑菌作用的洗脱液，用截留分子量为l0KD的超滤离心管于5000g条件下离心30min，有抑菌活性的滤过过滤层析与超滤离心，将上清液上样于SephadexG‑50过滤层析柱，用0.1mol/L乙酸钠溶液，pH7.0进行洗脱，物冷冻干燥，‑20℃保存。