[发明专利]一种银杏内酯有效部位检测方法

摘要

本发明为一种银杏内酯有效部位检测方法。本发明涉及植物提取领域，具体涉及一种银杏内酯的提取分离方法。本发明所解决的技术问题是提供一种银杏内酯的提取分离方法，该提取分离方法可得到组分固定的银杏内酯。该方法经提取、萃取、过柱、析晶、混晶步骤所得银杏内酯中，含白果内酯(C15H18O8)25.0％～50.0％、银杏内酯A(C20H24O9)20.0％～45.0％、银杏内酯B(C20H24O10)10.0％～30.0％、银杏内酯C(C20H24O11)5.0％～15.0％，且白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C总量大于95％。

主权项

银杏内酯有效部位的检测方法，其包括以下分项检测： a)性状：类白色或微黄色结晶性粉末； b)水分：60℃减压干燥减失重量小于5.0％； c)蛋白质：在595nm波长处吸光度小于0.05； d)鞣质、树脂、草酸盐、钾离子的检测： 鞣质：取蛋白质检查项供试品溶液1ml，加入稀醋酸1滴，再加明胶氯化钠试液5滴，摇匀，放置10分钟，未出现浑浊或沉淀； 树脂：取蛋白质检查项供试品溶液5ml，加盐酸1滴，放置30分钟，无树脂状物质析出； 草酸盐：取蛋白质检查项供试品溶液2ml，用稀盐酸调节pH值至1～2，滤过，滤液用氨水调节pH值为5～6，加3％氯化钙溶液3滴，放置10分钟，未出现浑浊或沉淀； 钾离子：取蛋白质检查项供试品溶液2ml，置10ml纳氏比色管中，加碱性甲醛溶液0.6ml、3％EDTA溶液2滴、3％四苯硼钠溶液0.5ml，加水稀释至10ml，另取标准氯化钾溶液0.8ml，同法试验，供试品溶液的浊度不高于对照溶液； e)残留溶剂 (1)乙醇、乙酸乙酯和正己烷：含乙醇和乙酸乙酯均小于0.5％，正己烷小于0.029％； (2)树脂残留量：含己内酰胺小于0.0015％； f)总银杏酸：含总银杏酸小于5ppm； g)大分子和聚合物：凝胶色谱法测定无残留大分子和聚合物，LC‑MS法测定，结果无分子量大于1000的大分子和聚合物， h)重金属：小于10ppm； i)砷盐：小于2ppm； j)异常毒性：制成每1ml中含0.2mg的溶液，符合静脉注射法给药； k)指纹图谱：HPLC法测定，记录60分钟的色谱图，按中药色谱指纹图谱相似度评价系统，四个共有峰相似度大于0.95； 1)含量：HPLC法测定，按干燥品计算，含白果内酯(C15H18O8)应为25.0％～50.0％、银杏内酯A(C20H24O9)应为20.0％～45.0％、银杏内酯B(C20H24O10)应为10.0％～30.0％、银杏内酯C(C20H24O11)应为5.0％～15.0％，且白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C总量大于95％； m)热原检查：体温升高低于0.6℃。