[发明专利]耐离子液体地霉菌及其纤维素酶原位糖化甘蔗渣的方法

摘要

本发明耐离子液体地霉菌及其纤维素酶原位糖化甘蔗渣的方法，属于微生物技术领域。涉及一株耐受（IL）1,3-二甲基咪唑磷酸二甲酯（[Mmim]DMP）的纤维素酶产生菌地霉菌属Galactomycessp.，其代谢的纤维素酶可耐受[Mmim]DMP，分别在培养体系添加含有5%（v/v）的[Mmim]DMP和反应体系中含有25%（v/v）的[Mmim]DMP中仍表现出较高的活性。另外，该纤维素酶可实现原位高效酶解甘蔗渣。本发明工艺简单，与现有的离子液体处理甘蔗渣后再生酶解的“两步法”相比，具有效率高、过程经济、三废少等优点。

主权项

耐离子液体地霉菌及其纤维素酶原位糖化甘蔗渣的方法，其特征在于按照如下步骤进行：（1）菌株的培养：摇瓶培养：将地霉菌Galactomyces sp.采用本领域常规的方法，在摇瓶培养基中进行扩增培养72~192 h，培养温度为25~35 °C； （2）纤维素酶冻干粉制备：将上述培养获得的发酵液经过离心8 min除去菌体，硫酸铵沉淀之后获得活性粗蛋白，活性蛋白进一步冷冻干燥获得纤维素酶冻干粉；（3）冻干纤维素酶粉原位酶解甘蔗渣：离子液体1,3‑二甲基咪唑磷酸二甲酯在120 °C下对甘蔗渣进行溶解预处理30 min后，加入pH=4.8乙酸‑乙酸钠缓冲液形成离子液体/溶剂体系，离子液体含量占离子液体/溶剂体系体积的25%，然后按离子液体/溶剂体系计用终浓度为1‑10 g/L的步骤（2）中的纤维素酶进行甘蔗渣的原位酶解，在50 °C和160 rpm的恒温摇床上振荡反应，即可达到酶解甘蔗渣的目的，其中离子液体与甘蔗渣的质量比为5：1。