[发明专利]乳杆菌冻干产品及其制备方法

摘要

本发明涉及嗜酸乳杆菌、副干酪乳杆菌或鼠李糖乳杆菌的冻干粉制剂的制备方法，提供了一种在制备嗜酸乳杆菌、副干酪乳杆菌或鼠李糖乳杆菌冻干产品过程中使用的培养基；发明人将影响细菌发酵的两个关键因素相结合，创造性地在高密度发酵过程中采用两段式pH、三段式变温相结合的方式进行发酵，最大细胞生物量和最高发酵活力较单一方式得到明显提高，同时得到的冻干制剂中活菌数高、稳定性好；同时还提供了一种优良的冻干保护剂。

主权项

嗜酸乳杆菌、副干酪乳杆菌或鼠李糖乳杆菌冻干产品的制备方法，按以下步骤进行：一、高密度培养将按常规方法活化的嗜酸乳杆菌、副干酪乳杆菌或鼠李糖乳杆菌以2%的接种量接种于灭菌的培养基中进行发酵；发酵过程中pH采用两段式，总发酵时间10h，第一阶段将发酵液的pH用质量浓度10%的氨水控制在6.0‑6.5，发酵7.0h；第二阶段不控制发酵液的pH，发酵3.0h；发酵过程中采用三段式变温培养模式，第一阶段将发酵温度控制在42.5‑45.0℃，发酵3.5h；第二阶段将发酵温度控制在35‑37℃，发酵3.5h；第三阶段将发酵温度控制在37‑40℃，发酵3h；其中所述培养基为：80‑120g的脱脂乳粉，50‑70g的甜菜糖蜜，40‑60g的玉米淀粉糖浆、0.50‑0.70g的酵母膏或酵母粉、12mg的尿嘧啶和黄嘌呤、0.005mg的生物素和叶酸、2.0mg的尼克酸和泛酸钙、2.0mg的核黄素、1.0mg盐酸硫胺素、0.01g的甲酸、20g的乳糖和50g的麦芽汁加入蒸馏水并定容至1000mL；在发酵过程中搅拌速度为120rpm，直至发酵结束；其中，尿嘧啶和黄嘌呤的比例为1：2；生物素和叶酸的比例为1：1；尼克酸和泛酸钙的比例为1：3；二、洗脱三、富集四、冻干保护将获得的菌体浓缩物与冻干保护剂以质量比为1：1‑1：2进行混合，然后进行冷贮；其中冻干保护剂的组成：将150g的脱脂乳粉、20g的斯盘60、80g的海藻糖、50g的蔗糖糖蜜和15g的维生素C加入蒸馏水并定容至1000mL；将此混合物在4‑15℃的环境中放置20h；五、菌体的干燥将步骤四得到的混合物以2℃/min的降温速率降至‑50℃，保持30min；在真空度为0.05MPa的条件下，以1℃/min的速率升温至‑35℃，并维持此温度至真空度达到0.01MPa完成主干燥阶段；以5℃/min的速率升温至10℃并维持此温度至真空度达到0.03MPa完成解析干燥阶段，取出后用颗粒机粉碎，再用无菌铝箔纸盒包装并置于‑20℃的环境中贮藏。