[发明专利]一种化血胆组织培养快速繁殖的方法

摘要

本发明涉及一种化血胆组织培养快速繁殖的方法，特别是一种野生药用植物化血胆［Melasma arvense (Benth.) Hand.-Mazz. ］组织培养快速繁殖的方法。属野生药用植物种苗繁殖技术领域。本发明方法包括外植体选择消毒、诱导增殖培养、生根培养三个阶段，具有繁殖率高、繁殖速率快等优点，解决了化血胆繁殖率低、种子育苗困难、生长缓慢等问题，可以在短时间内提供大量种苗。本发明提供了一种工厂化大规模提供化血胆成品苗快速繁殖的方法，满足了中药资源开发的迫切需要。

主权项

一种化血胆组织培养快速繁殖的方法，其特征在于包含下列步骤：A.外植体的选择和消毒：剪取化血胆生长旺盛的带节嫩茎枝，清洗、消毒后去除叶片，带入无菌操作台；用75%乙醇浸泡5S，快速取出后用无菌水清洗2次，再将茎枝放入2%次氯酸钠溶液中浸泡5min，取出后用无菌水清洗3次，用剪刀将取枝条剪切成带节小茎段，接种于诱导增殖培养基上；B.诱导增殖培养：诱导增殖培养基成分为1/2MS+6‑BA0.5～1.0mg/L+Pt50g/L+Bn80g/L+25g/L蔗糖+8～10g/L琼脂,培养基pH值为5.8～6.0；诱导培养条件为光照强度1500‑2000lx，光照10h/d，温度22～24℃；在诱导培养基培养5～10d后，节上会出现大量分枝，待芽枝长到5～10cm，切取芽枝在相同培养条件下连续培养，可实现不断增殖；C．生根培养：切取2～3cm生长健壮的新梢转接到生根培养基上；生根培养基成分为1/2MS+NAA0.1～0.5mg/L+Pt30g/L+Bn100g/L+25g/L蔗糖+8～10g/L琼脂+0.2g/L活性炭,培养基pH值为5.8～6.0；生根培养条件为光照强度2000～3000lx，光照12h/d，温度22～24℃；在生根培养基培养40～60d后可成苗。