[发明专利]一种从粉虱座壳孢菌中提取17(21)-何帕烯-6,12β-二醇的方法

摘要

本发明公开一种从粉虱座壳孢菌中提取17(21)-何帕烯-6,12β-二醇的方法。包括代谢产物的培养、提取、浓缩得粗提物，粗提物过200~300目硅胶柱，用石油醚:乙酸乙酯梯度洗脱，将石油醚:乙酸乙酯体积比20:1~15:1洗脱液合并浓缩，利用重结晶得到粉虱座壳孢菌中的17(21)-何帕烯-6,12β-二醇。

主权项

1.一种从粉虱座壳孢菌中提取17(21)-何帕烯-6,12β-二醇的方法，其特征在于：所述方法的具体步骤如下：A:粉虱座壳孢菌活化后，取菌块接种到M102培养基中，在120～160r/min、20～28℃条件下连续培养5～10天即初级培养，按8％～10％接种量再次转接到M102培养基中，在20～28℃条件下静止培养30～40天，即得次级代谢产物；B:菌液和菌丝体过滤分离，菌丝体：甲醇体积比=1: 5～10浸泡24～48小时，浸泡液旋蒸浓缩至干，回收甲醇，用1倍菌丝体体积的水溶解旋干物，将水溶物与乙酸乙酯按体积比1:1～1:3进行摇瓶萃取，摇30～60min静止30～60min，将乙酸乙酯部分浓缩得浸膏；C:浸膏上200～300目硅胶柱，以石油醚: 乙酸乙酯体积比70:1到1:1梯度洗脱，合并体积比20:1到15:1的洗脱液，自然挥干，利用重结晶得17(21)-何帕烯-6,12β-二醇；所述17(21)-何帕烯-6,12β-二醇的结构式如下：所述M102培养基的制备方法如下：取蔗糖 30g，麦芽提取物 20 g，蛋白胨 2.0 g，酵母提取物 1.0 g，KCl 0.5 g，MgSO₄ 0.5 g，KH₂PO₄ 0.5 g，混匀后加单蒸水定容至1L，分装到250ml三角瓶中，每瓶装100ml，在121℃高压下灭菌20min。