[发明专利]一种无载体固定化酶制备大豆多肽的方法有效
申请号: | 201210571820.7 | 申请日: | 2012-12-26 |
公开(公告)号: | CN102978269A | 公开(公告)日: | 2013-03-20 |
发明(设计)人: | 江连洲;李杨;齐宝坤;冯红霞;王欢;隋晓楠;王中江;王胜男 | 申请(专利权)人: | 东北农业大学 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 150030 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | 一种无载体固定化酶制备大豆多肽的方法属于大豆多肽提取技术,该方法包括以下步骤:(1)将碱性蛋白酶溶解于磷酸盐缓冲液中,加入乙醇沉淀聚集后再加入戊二醛进行交联得交联酶聚集体即固定化碱性蛋白酶;(2)将大豆分离蛋白溶液加水混合配制成大豆分离蛋白溶液,调节pH和温度,再加入步骤(1)中得到的固定化酶进行酶解,酶解后回收固定化酶,酶解液经离心分离得上清液,上清液经冷冻干燥即得大豆多肽;本方法制备的无载体固定化碱性蛋白酶活性高,无需成本高昂的载体,同时将该固定化酶酶解大豆分离蛋白制备大豆多肽,所需的工艺设备简单,能耗低,且固定化酶可回收重复使用,减少资源浪费,节省成本。 | ||
搜索关键词: | 一种 载体 固定 制备 大豆 多肽 方法 | ||
【主权项】:
一种无载体固定化酶制备大豆多肽的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:(1)将protex‑6L碱性蛋白酶溶解于磷酸盐缓冲液中,加入乙醇沉淀聚集,所述的乙醇浓度50‑90%,聚集时间10‑50min,聚集后再加入戊二醛进行交联得交联酶聚集体即固定化碱性蛋白酶,所述的戊二醛浓度10‑50%,交联时间1‑3h;(2)将大豆分离蛋白加水混合配制成大豆分离蛋白溶液,调节pH和温度,再加入步骤(1)中得到的固定化酶进行酶解,酶解时间2‑4h,加酶量3000‑7000U/g,酶解pH 8‑10,酶解温度40‑80℃,酶解后回收固定化酶,酶解液经离心分离得上清液,上清液经冷冻干燥即得大豆多肽。
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