[发明专利]一种甜瓜白粉病菌的分离方法

摘要

本发明公开一种甜瓜白粉病菌的单孢子分离方法，通过采集发病的甜瓜叶片，用灭菌的刷子刷去其表面的老孢子，将病叶保温保湿繁殖新孢子。把培养好的新鲜分生孢子用洗耳球吹入水琼脂平板上，在解剖镜下，用特制的挑针挑取单个分生孢子接种在灭菌的感病甜瓜或黄瓜品种的叶碟上。将叶碟平铺在装入甘露醇培养基的培养皿里，盖上培养皿盖后放入光照培养箱，培养7天后即可得到纯化的甜瓜白粉病菌菌落。本项发明通过特制的挑针挑出单个分生孢子，并在合适的培养基和培养条件下，促使单个分生孢子正常萌发，分离出的甜瓜白粉菌病原菌纯、无小种交叉感染，保障了后续研究结果的准确和可靠，具有重要的实用价值。

主权项

一种甜瓜白粉病菌的单孢子分离方法，其特征在于，具体分离方法步骤如下：（1）将在甜瓜田间采集的白粉病病叶，放在冰盒中，吹去表面老孢子，放入培养皿中，25℃光照培养箱中保湿培养，繁殖新鲜的分生孢子；在超净工作台上，将新长出的分生孢子用灭菌的洗耳球吹入水琼脂平板上，用解剖镜在水琼脂平板上找到无色透明的小颗粒，即单个白粉病菌分生孢子；（2）用特制挑针挑出单孢子接种在灭菌的感病甜瓜或黄瓜品种的直径1.2厘米叶碟上，将叶碟平铺在装入甘露醇培养基的培养皿中；培养皿放入光照培养箱，培养7天以后，长出纯化的甜瓜白粉病菌菌落；（3）特制挑针制作方法：将人眉毛根部用透明胶布粘在牙签上，灭菌处理，眉毛尖用灭菌的剪刀剪掉1毫米；（4）上述步骤（2）中的甘露醇培养基每升含：30克甘露醇，50毫克苯并咪唑，9克琼脂，蒸馏水定容至1升后灭菌；（5）甜瓜白粉病菌单孢子培养条件：光周期，12小时光照/12小时暗培养；光照强度，1500勒克斯；温度，12小时光照时22℃/12小时暗培养时18℃。