[发明专利]一种人转铁蛋白乳腺特异性表达载体的构建及应用有效
| 申请号： | 201210594330.9 | 申请日： | 2012-12-31 |
| 公开（公告）号： | CN103911393B | 公开（公告）日： | 2019-01-18 |
| 发明（设计）人： | 曾凡一;颜景斌;曾溢滔 | 申请（专利权）人： | 上海滔滔转基因工程股份有限公司;上海市儿童医院 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/12;C07K14/79;A01K67/027 |
| 代理公司： | 上海智信专利代理有限公司 31002 | 代理人： | 薛琦;沈利 |
| 地址： | 201604 上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用转基因动物的乳腺生产人转铁蛋白的方法及其表达载体。本发明的方法包括利用含有人转铁蛋白基因表达盒的载体将人转铁蛋白基因表达盒转入哺乳动物基因组中获得转基因动物，从转基因动物乳汁中获得人转铁蛋白，其中，该表达盒从5’到3’依次包括启动子、人转铁蛋白基因和牛生长激素基因终止子，所述启动子是山羊β‑酪蛋白基因，其序列如SEQ ID NO.1所示，所述人转铁蛋白基因是序列表中SEQ ID NO.2所示，所述的载体是真核表达载体pcDNA3.1，所述的哺乳动物不包括人。本发明的方法，在动物的乳汁中人转铁蛋白的浓度至少可达到5g/L，比现有的方法提高了160倍以上，具有巨大的商业利用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 铁蛋白 乳腺 特异性 表达 载体 构建 应用 | ||
【主权项】：
1.一种利用转基因动物的乳腺组织生产人转铁蛋白的方法，包括利用含有人转铁蛋白基因表达盒的载体将人转铁蛋白基因表达盒转入哺乳动物基因组中获得转基因动物，使该转基因动物分泌乳汁，从乳汁中获得人转铁蛋白，其特征在于，所述的人转铁蛋白基因表达盒从5’到3’依次由启动子、人转铁蛋白基因和pcDNA3.1载体中携带的牛生长激素基因终止子组成，其中所述的启动子是山羊β‑酪蛋白基因启动子，其长度为6.5Kb，序列如SEQ ID NO.1所示，其中包括启动子近端成分、远端长达4Kb的上游调控区和山羊β‑酪蛋白第一内含子，第一外显子和第二外显子，所述的人转铁蛋白基因是序列表中SEQ ID NO.2所示，所述的终止子的序列为牛生长激素基因终止子，所述的含有人转铁蛋白基因表达盒的载体是真核表达载体pcDNA3.1，所述的哺乳动物不包括人。
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