[发明专利]低岩藻糖细胞系及其应用有效
| 申请号： | 201280021537.5 | 申请日： | 2012-03-05 |
| 公开（公告）号： | CN103597073B | 公开（公告）日： | 2019-06-07 |
| 发明（设计）人： | D·黑尔曼;M·巴尔-西蒙;M·托耶斯特-阿契杜夫 | 申请（专利权）人： | 默克雪兰诺有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12N9/10;C12N15/01 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人： | 马彦 |
| 地址： | 瑞士科*** | 国省代码： | 瑞士;CH |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用作表达重组蛋白宿主细胞的具有零岩藻糖水平的细胞的选择方法。该方法包括：(d)使CHO细胞接触氨甲喋呤(MTX)从而在CHO细胞的细胞群中导入基因突变；(e)使含有突变细胞的CHO细胞群接触无毒岩藻糖结合剂一定的时间量，使岩藻糖结合剂结合于该细胞群细胞膜的岩藻糖部分，其中所述一定的时间量不会导致杀伤细胞；和(f)清除含突变细胞的细胞群中结合该岩藻糖结合剂的细胞亚群，从而选出细胞用作表达重组蛋白的宿主细胞，所选细胞的岩藻糖含量为零。本发明还公开了用作表达重组蛋白宿主细胞的细胞和细胞系。 | ||
| 搜索关键词： | 低岩藻糖 细胞系 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种分离的CHO细胞，含有表达的突变GDP‑甘露糖4,6‑脱水酶，即GMD，所述细胞在无外源性岩藻糖条件下的岩藻糖含量为零，经基因修饰而表达氨基酸序列如SEQ ID NO：23和/或24所示的突变GMD，并且，所述细胞表现出高于100群体倍增的稳定岩藻糖表型。
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