[发明专利]用于结晶G-蛋白偶联受体目的的新的融合伴体

摘要

描述了GPCR-融合伴体蛋白，其包含G蛋白偶联受体（GPCR）的GPCR和融合伴体例如红素氧还蛋白、细胞色素b562RIL（Bril、bRIL、BRIL）、T4溶菌酶C-端片段（Cterm-T4L）、黄素氧还蛋白或木聚糖酶，所述融合伴体替换所述GPCR的第五和第六螺旋之间的GPCR第三胞内环的一部分或全部，或其连接于所述GPCR的末端或C端。描述了晶体形式的GPCR-融合伴体蛋白，其任选地具有适合于所述GPCR的x-射线晶体结构测定的质量。描述了使用GPCR-融合伴体蛋白中的融合伴体来支持GPCR-融合伴体蛋白的结晶以用于所述GPCR的x-射线晶体结构测定的方法。还描述了通过蛋白质数据库的筛选来鉴定其他适合的融合伴体的方法。

主权项

一种包含GPCR‑融合伴体蛋白的组合物，所述融合蛋白从N‑端至C‑端包含：（i）包含G‑蛋白偶联受体（GPCR）的一部分的第一结构域，其中所述第一结构域包含所述GPCR的第一至第五跨膜结构域，（ii）包含融合伴体氨基酸序列的第二结构域，其中所述序列与选自红素氧还蛋白、细胞色素b₅₆₂RIL（Bril）、黄素氧还蛋白、木聚糖酶或T4溶菌酶C‑端片段的蛋白质至少90%同源，以及（iii）包含所述GPCR的一部分的第三结构域，其中所述第三结构域包含所述GPCR的第六和第七跨膜结构域。