[发明专利]少数核酸物质的定量

摘要

本技术部分涉及核酸样品中少数核酸物质的定量。在一些实施方式中，提供了用于测定母体样品中胎儿核酸的量(例如，绝对量、相对量)的方法。所述方法使用抑制性寡核苷酸来降低优势核酸的扩增效率，和/或使用靶竞争者来改善所述扩增。

主权项

试剂(i)、(ii)和(iii)在制备用于测定样品中少数核酸物质的量的试剂盒中的应用，所述测定如下进行：(a)在扩增条件下使含有少数物质和多数物质的核酸样品接触所述试剂(i)、(ii)和(iii)，其中，所述少数物质和所述多数物质的组合构成所述样品中的总核酸，由此产生少数核酸扩增产物和总核酸扩增产物；(b)分离所述少数核酸扩增产物和总核酸扩增产物，从而产生分离的少数核酸扩增产物和总核酸扩增产物；和(c)基于所述分离的少数核酸扩增产物和总核酸扩增产物各自的量，来确定所述样品中的所述少数核酸物质的分数，其中：试剂(i)包含第一组扩增引物，所述第一组扩增引物特异性扩增样品核酸中的第一区域，所述第一区域包含以下特征(1)存在于所述少数核酸物质中但不存在于所述多数核酸物质中，或(2)不存在于所述少数核酸物质中但存在于所述多数核酸物质中，试剂(ii)包含第二组扩增引物，所述第二组扩增引物扩增所述样品核酸中的第二区域，以允许测定所述样品中的总核酸，其中所述第一区域和所述第二区域不同，和试剂(iii)包含一种或多种抑制性寡核苷酸，所述抑制性寡核苷酸减少所述第二区域的扩增，从而产生少数核酸扩增产物和总核酸扩增产物，其中，所述第二组扩增引物的量相对于所述一种或多种抑制性寡核苷酸的量具有一定比例，由此所述总核酸扩增产物相对于没有抑制性寡核苷酸存在下会产生的总扩增产物而言有所减少，并且，由此所述总核酸扩增产物被扩增至与所述少数核酸扩增产物相似的程度。