[发明专利]用于生产烯烃的微生物和方法

摘要

本发明公开了含有烯烃途径的非天然存在的微生物体，所述烯烃途径具有至少一种编码烯烃途径酶的外源核酸，所述烯烃途径酶以足以将醇转化成烯烃的量表达。本发明另外提供了使用这样的微生物体生产烯烃的方法，其中在特定条件下培养如本文中所述的含有烯烃途径的非天然存在的微生物体足以生产烯烃的时间段。

主权项

一种非天然存在的微生物体，所述微生物体具有烯烃途径且包含至少一种编码烯烃途径酶的外源核酸，所述烯烃途径酶以足以将醇转化成烯烃的量表达，其中所述烯烃途径包含选自以下的途径：(1)醇激酶和磷酸裂合酶；(2)二磷酸激酶和二磷酸裂合酶；和(3)醇激酶、磷酸烷基酯激酶和二磷酸裂合酶，其中所述醇是式(I)的化合物且其中所述烯烃是式(II)的化合物其中R¹、R²、R³和R⁴独立地在所述醇和所述烯烃之间是相同的，且各自独立地是(a)氢、氰基、卤代或硝基；(b)C_1‑6烷基、C_2‑6烯基、C_2‑6炔基、C_3‑7环烷基、C_6‑14芳基、C_7‑15芳烷基、杂芳基或杂环基，每个任选地被一个或多个取代基Q取代；或(c)‑C(O)R^1a、‑C(O)OR^1a、‑C(O)NR^1bR^1c、‑C(NR^1a)NR^1bR^1c、‑OR^1a、‑OC(O)R^1a、‑OC(O)OR^1a、‑OC(O)NR^1bR^1c、‑OC(＝NR^1a)NR^1bR^1c、‑OS(O)R^1a、‑OS(O)₂R^1a、‑OS(O)NR^1bR^1c、‑OS(O)₂NR^1bR^1c、‑NR^1bR^1c、‑NR^1aC(O)R^1d、‑NR^1aC(O)OR^1d、‑NR^1aC(O)NR^1bR^1c、‑NR^1aC(＝NR^1d)NR^1bR^1c、‑NR^1aS(O)R^1d、‑NR^1aS(O)₂R^1d、‑NR^1aS(O)NR^1bR^1c、‑NR^1aS(O)₂NR^1bR^1c、‑SR^1a、‑S(O)R^1a、‑S(O)₂R^1a、‑S(O)NR^1bR^1c或‑S(O)₂NR^1bR^1c；其中每个R^1a、R^1b、R^1c和R^1d独立地是氢、C_1‑6烷基、C_2‑6烯基、C_2‑6炔基、C_3‑7环烷基、C_6‑14芳基、C_7‑15芳烷基、杂芳基或杂环基；或R^1a和R^1c与它们所连接的C和N原子一起形成杂环基；或R^1b和R^1c与它们所连接的N原子一起形成杂环基；其中每个Q独立地选自(a)氧代、氰基、卤代和硝基；(b)C_1‑6烷基、C_2‑6烯基、C_2‑6炔基、C_3‑7环烷基、C_6‑14芳基、C_7‑15芳烷基、杂芳基和杂环基，它们中的每一个进一步任选地被一个或多个取代基Q^a取代，在一种实施方式中，任选地被1、2、3或4个取代基Q^a取代；和(c)‑C(O)R^a、‑C(O)OR^a、‑C(O)NR^bR^c、‑C(NR^a)NR^bR^c、‑OR^a、‑OC(O)R^a、‑OC(O)OR^a、‑OC(O)NR^bR^c、‑OC(＝NR^a)NR^bR^c、‑OS(O)R^a、‑OS(O)₂R^a、‑OS(O)NR^bR^c、‑OS(O)₂NR^bR^c、‑NR^bR^c、‑NR^aC(O)R^d、‑NR^aC(O)OR^d、‑NR^aC(O)NR^bR^c、‑NR^aC(＝NR^d)NR^bR^c、‑NR^aS(O)R^d、‑NR^aS(O)₂R^d、‑NR^aS(O)NR^bR^c、‑NR^aS(O)₂NR^bR^c、‑SR^a、‑S(O)R^a、‑S(O)₂R^a、‑S(O)NR^bR^c和‑S(O)₂NR^bR^c，其中每个R^a、R^b、R^c和R^d独立地是(i)氢；(ii)C_1‑6烷基、C_2‑6烯基、C_2‑6炔基、C_3‑7环烷基、C_6‑14芳基、C_7‑15芳烷基、杂芳基或杂环基，每个任选地被一个或多个取代基Q^a取代，在一种实施方式中，任选地被1、2、3或4个取代基Q^a取代；或(iii)R^b和R^c与它们所连接的N原子一起形成杂环基，所述杂环基任选地被一个或多个取代基Q^a取代，在一种实施方式中，任选地被1、2、3或4个取代基Q^a取代；其中每个Q^a独立地选自：(a)氧代、氰基、卤代和硝基；(b)C_1‑6烷基、C_2‑6烯基、C_2‑6炔基、C_3‑7环烷基、C_6‑14芳基、C_7‑15芳烷基、杂芳基和杂环基；和(c)‑C(O)R^e、‑C(O)OR^e、‑C(O)NR^fR^g、‑C(NR^e)NR^fR^g、‑OR^e、‑OC(O)R^e、‑OC(O)OR^e、‑OC(O)NR^fR^g、‑OC(＝NR^e)NR^fR^g、‑OS(O)R^e、‑OS(O)₂R^e、‑OS(O)NR^fR^g、‑OS(O)₂NR^fR^g、‑NR^fR^g、‑NR^eC(O)R^h、‑NR^eC(O)OR^f、‑NR^eC(O)NR^fR^g、‑NR^eC(＝NR^h)NR^fR^g、‑NR^eS(O)R^h、‑NR^eS(O)₂R^h、‑NR^eS(O)NR^fR^g、‑NR^eS(O)₂NR^fR^g、‑SR^e、‑S(O)R^e、‑S(O)₂R^e、‑S(O)NR^fR^g和‑S(O)₂NR^fR^g；其中每个R^e、R^f、R^g和R^h独立地是(i)氢；(ii)C_1‑6烷基、C_2‑6烯基、C_2‑6炔基、C_3‑7环烷基、C_6‑14芳基、C_7‑15芳烷基、杂芳基或杂环基；或(iii)R^f和R^g与它们所连接的N原子一起形成杂环基。