[发明专利]用于修饰预定的靶核酸序列的组合物和方法

摘要

本文提供了用于修饰预定的核酸序列的组合物和方法。提供了包含多肽部分和赋予特异性的核酸(SCNA)的可编程核蛋白分子复合物，其在靶细胞中体内组装，并能够与预定的靶核酸序列相互作用。可编程核蛋白分子复合物能够特异性修饰和/或编辑靶核酸序列内的靶位点，和/或修饰靶核酸序列的功能。

主权项

1.一种用于通过可编程核蛋白复合物修饰人细胞之外的真核宿主细胞中或培养的人细胞中的靶基因组核酸或细胞器核酸内的预定的靶位点的方法，所述方法用于非治疗目的，并且所述方法包括将下列递送至所述真核宿主细胞或所述培养的人细胞：a)可编程多肽或编码所述可编程多肽的核酸序列，所述多肽包含：(i)效应器结构域，所述效应器结构域是核酸酶或源自核酸酶，所述效应器结构域在所述靶位点的一条或两条链中产生断裂以在靶基因组核酸或细胞器核酸内的所述预定的靶位点处引发突变、缺失、置换或外源核酸分子的整合；以及(ii)与赋予特异性的核酸相互作用的连接域，所述相互作用归因于以下相互作用类型的一种或更多种：配体‑受体、配体‑底物、氢键、范德华键、体内形成的共价键、离子键和疏水相互作用；b)赋予特异性的核酸分子或编码所述赋予特异性的核酸分子的核酸，所述赋予特异性的核酸分子包含：(i)与所述靶位点侧翼的靶核酸的区域互补的核苷酸序列；以及(ii)以高结合亲和力特异性附着至所述可编程多肽的所述连接域的识别区域；其中所述多肽在包含所述赋予特异性的核酸的所述真核宿主细胞或所述培养的人细胞中的存在使所述多肽能够附着至所述赋予特异性的核酸，形成有活性的编程的核蛋白复合物，其中所述赋予特异性的核酸提供所述有活性的编程的核蛋白复合物对所述真核宿主细胞或所述培养的人细胞内的所述靶核酸内的所述靶位点的特异性和结合能力，从而将所述有活性的编程的核蛋白复合物靶向所述真核宿主细胞或所述培养的人细胞内的所述靶核酸内的所述靶位点，使通过所述有活性的编程的核蛋白复合物修饰所述靶位点成为可能。