[发明专利]表达载体元件组合、新的生产用细胞产生方法及其在重组产生多肽中的用途有效
| 申请号： | 201280062793.9 | 申请日： | 2012-12-19 |
| 公开（公告）号： | CN104011075B | 公开（公告）日： | 2017-06-06 |
| 发明（设计）人： | P·M·许尔斯曼;H·克内根 | 申请（专利权）人： | 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 |
| 主分类号： | C07K16/00 | 分类号： | C07K16/00;C12N15/67 |
| 代理公司： | 北京市中咨律师事务所11247 | 代理人： | 凌立,黄革生 |
| 地址： | 瑞士*** | 国省代码： | 暂无信息 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本文报道，对于瞬时转染，人延伸因子1α启动子(含有内含子A)的使用提供增强的生产力(在LC‑HC‑SM组织中)，与使用SV40polyA信号序列相比，牛生长激素polyA信号序列的使用提供增强的生产力，在包含hCMV启动子的载体中，向bGH PolyA信号序列加入HGT产生提高的生产力，载体组织LC(3`‑5′)‑HC‑SM产生改善的表达。对于稳定库，据报道，用包含hEF1α启动子的载体产生的库在分批分析中显示增强的生产力，用包含hEF1α启动子的载体产生的克隆显示减少的低产克隆数，且用包含hEF1α启动子的载体产生的克隆显示更高的IgG表达稳定性。对于单克隆，据报道，选择标记放置在下游的载体组织(LC‑HC‑SM)对单克隆的生产力具有积极作用，且用包含bGH polyA信号序列和hGT的载体产生的克隆具有更高的生产力。 | ||
| 搜索关键词： | 表达 载体 元件 组合 生产 细胞 产生 方法 及其 重组 多肽 中的 用途 | ||
【主权项】：
用于选择稳定转染的重组哺乳动物细胞的方法，其包括以下步骤：a)用包含以下的表达载体转染哺乳动物细胞：‑按5’至3’方向包含hCMV启动子、编码抗体轻链(LC)的核酸、bGH polyA信号序列和hGT终止子序列的第一表达盒；‑按5’至3’方向包含hCMV启动子、编码抗体重链(HC)的核酸、bGH polyA信号序列和hGT终止子序列的第二表达盒；其中第一表达盒和第二表达盒单向排列，从而获得大量重组哺乳动物细胞；b)从所述大量重组哺乳动物细胞选择单个稳定转染的重组哺乳动物细胞，其特征在于所述表达载体进一步包含选择标记(SM)；所述表达盒按LC‑HC‑SM顺序排列。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于弗·哈夫曼-拉罗切有限公司，未经弗·哈夫曼-拉罗切有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201280062793.9/，转载请声明来源钻瓜专利网。
