[发明专利]用于标记白细胞的细胞内靶标和细胞外靶标的方法有效
| 申请号： | 201280063544.1 | 申请日： | 2012-12-21 |
| 公开（公告）号： | CN104011542A | 公开（公告）日： | 2014-08-27 |
| 发明（设计）人： | 法布里斯·马莱格;安德烈亚斯·范艾多芬 | 申请（专利权）人： | 贝克曼考尔特公司 |
| 主分类号： | G01N33/50 | 分类号： | G01N33/50;G01N33/569 |
| 代理公司： | 上海市华诚律师事务所 31210 | 代理人： | 汤国华 |
| 地址： | 美国加利*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | 本发明涉及用于标记白细胞的细胞内靶标和细胞外靶标的方法，以及用于执行所述方法的试剂盒。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 标记 白细胞 细胞内 靶标 细胞 方法 | ||
【主权项】：
一种用于标记白细胞的细胞内靶标和细胞外靶标的方法，所述方法包括以下步骤：(a)形成以下物质的组合：(i)细胞组合物，所述细胞组合物包含至少白细胞和血红细胞，以及(ii)第一溶液，所述第一溶液包含能够交联所述白细胞的细胞内蛋白、脂蛋白和核酸的一种或多种试剂；(b)将第二溶液添加到所述组合中，所述第二溶液包含能够透化所述白细胞、裂解所述血红细胞并中和所述第一溶液中的所述一种或多种试剂的交联活性的一种或多种试剂，其中所述第二溶液包含：(i)量为0.05％至0.5％(w/v)的洗涤剂，和(ii)浓度为1至100mM的季铵盐或含胺的化合物，其中所述第二溶液的pH为6.5或更低，并且其中所述第二溶液的添加体积介于所述组合的总体积的1倍和10倍之间；(c)在添加所述第二溶液的同时或在添加所述第二溶液之后添加特异性地结合到白细胞的细胞外靶标上的至少一种结合剂，以及特异性地结合到白细胞的细胞内靶标上的至少一种结合剂，其中所述结合剂的每一种包括可检测试剂；以及(d)将第三溶液添加到所述组合中，其中所述第三溶液的添加体积等于或大于所述第三溶液添加到其中的所述组合的总体积。
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