[发明专利]用于识别和定量化单链靶核酸的方法和试剂盒

摘要

本发明涉及一种用于识别和定量化至少一种单链靶核酸(9)的方法和用于检测样品中至少一种单链靶核酸(9)的试剂盒。该方法包括使至少一个固态载体(1)与至少一种互补链寡核苷酸7)、至少一种单链靶核酸(9)和至少一种具有标记(13)报道基因寡核苷酸(11)接触，其中在所述固态载体(1)上已经固定有至少一种俘获寡核苷酸(5)，并且通过读取载体(1)上的报道基因寡核苷酸(11)的标记(13)来识别所述靶核酸(9)。

主权项

一种用于识别和定量化至少一种单链靶核酸(9)的方法，包括以下步骤：a)提供至少一种固态载体(1)，在所述固体载体(1)上固定有至少一种俘获寡核苷酸(5)；b)在第一反应条件下使所述载体(1)与至少一种相反链寡核苷酸(7)、至少一种单链靶核酸(9)和至少一种具有标记(13)的报道基因寡核苷酸(11)接触，所述相反链寡核苷酸(7)包括与所述俘获寡核苷酸(5)至少部分互补的寡核苷酸序列、与所述靶核酸(9)互补的寡核苷酸序列和与所述报道基因寡核苷酸(11)至少部分互补的寡核苷酸序列，以使所述俘获寡核苷酸(5)和所述报道基因寡核苷酸(11)各自至少部分地与所述相反链寡核苷酸(7)杂交，以及使所述靶核酸(9)与所述相反链寡核苷酸(7)杂交，从而靶核酸(9)第一末端和俘获寡核苷酸(5)的自由端与相反链寡核苷酸(7)的相邻核苷酸形成碱基对，并且靶核酸(9)的第二末端和报道基因寡核苷酸(11)的第一末端与相反链寡核苷酸(7)的相邻核苷酸形成碱基对；c)在所述第一反应条件下培育所述载体(1)；d)连接靶核酸(9)的第一末端和俘获寡核苷酸(5)的自由端以使靶核酸(9)和俘获寡核苷酸(5)共价键合，并且连接靶核酸(9)的第二末端和报道基因寡核苷酸(11)的第一末端以使靶核酸(9)和报道基因寡核苷酸(11)共价键合；e)在第二反应条件下以如下方式培育载体(1)，使得仅在所述靶核酸(9)的两端被连接的情况下报道基因寡核苷酸(11)与载体(1)保持连接；f)读取载体(1)上的报道基因寡核苷酸(11)的标记(13)。