[发明专利]一种由口服基因工程发酵酵母介导的小鼠肠道DC细胞表达外源和内源基因的方法及应用

摘要

本发明涉及一种由口服基因工程发酵酵母介导的小鼠肠道DC细胞表达外源基因和内源基因的方法及应用，属于免疫学和基因工程技术领域。所述基因工程发酵酵母含有真核基因表达载体JMB84-CMV-β-catenin-HA-T2A-GFP-polyA或JMB84-CMV-eGFP-polyA，真核基因表达载体可以整合在酵母基因组或者作为酵母质粒随酵母细胞进行复制。应用该基因工程酵母饲喂6周龄FVB小鼠，5天后分离FVB小鼠肠道DC细胞可检测到目的基因的表达；若饲喂JMB84-CMV-eGFP-polyA载体，口服免疫35天后，能够在小鼠血清中检测到特异性抗体的产生。本发明具有应用基因工程酵母作为功能基因运送载体，靶向调控哺乳动物肠道免疫细胞(树突状细胞)的功能，能够应用于治疗自身免疫疾病和新型口服疫苗开发和生产的优点。

主权项

一种由口服基因工程发酵酵母介导的小鼠肠道DC细胞表达外源基因和内源基因的方法，包括给小鼠口服基因工程发酵酵母的步骤，其特征在于：所述基因工程发酵酵母为含有真核细胞表达载体的基因工程发酵酵母；所述真核细胞表达载体包含真核细胞启动子、功能基因cDNA或RNA干扰序列以及polyA信号片段，其中真核细胞启动子选自CMV、SV40、pCAG、hsp70、CIITA‑pI、CD11c、H1或U6启动子中的一种；所述功能基因cDNA或RNA干扰序列选自β‑Catenin、细菌、病毒抗原基因、GFP、β‑Catenin或CD40的RNA干扰序列中的一种；所述polyA信号片段选自为SV40polyA或actin polyA。