[发明专利]长柱金丝桃药材HPLC指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱和应用

摘要

本发明涉及长柱金丝桃药材HPLC指纹图谱的建立方法，包括供试品溶液的制备、色谱条件的选择，通过对10批次长柱金丝桃药材HPLC指纹图谱的对比，确定其共有指纹特征峰，得到长柱金丝桃药材的标准指纹图谱。本发明长柱金丝桃药材标准指纹图谱将长柱金丝桃药材作为一个整体对待，通过比较其共有特征峰可以找出不同药材之间的细微差异，因此适于对长柱金丝桃药材的真伪的鉴别和质量控制，保证了长柱金丝桃药材质量的稳定、均一和可控。

主权项

一种长柱金丝桃药材HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于：步骤如下：⑴供试品溶液的制备：取长柱金丝桃阴干全草粉碎成粗粉，采用超声萃取法提取长柱金丝桃中的总黄酮，在超生功率700W，乙醇浓度60%，料液比为1：30的条件下，超生30min，离心，取上清液作为供试品溶液；⑵指纹图谱的制作：色谱分离柱填料为5μm Kromasil‑C18，250×4.6mm；流动相为水‑乙腈；采用梯度洗脱的方式：0min→5min，5min→10min，10min→15min，15min→30min，30min→60min，60min→90min，乙腈5%→10%，10%→15%，15%→17%，17%→17%，17%→25%，25%→45%；流速0.8～1.0ml/min；检测波长275nm；柱温25～35℃，在此条件下分析供试品溶液，得到长柱金丝桃药材的指纹图谱；⑶标准指纹图谱的确定：按照本发明提供的方法，对9~13批长柱金丝桃药材建立了HPLC指纹图谱，通过分析比较，确定了26个共有特征峰，其保留时间分别为：3.734min，10.577min，13.210min，15.430min，17.263min，18.197min，19.457min，20.810min，21.690min，22.378min，26.799min，27.841min，32.829min，38.435min，46.334min，48.764min，51.484min，52.485min，56.275min，59.479min，61.069min，64.092min，66.858min，67.513min，76.489min，78.637min，这些共有特征峰构成了长柱金丝桃药材的指纹特征，可作为长柱金丝桃药材的标准指纹图谱。