[发明专利]检测结直肠癌血清miRNA-128的专用引物、试剂盒及方法

摘要

本发明公开了一种检测结直肠癌血清miR-128的专用引物，包括miR-128的逆转录引物和检测引物、U6的逆转录引物和检测引物、miRNA-16的逆转录引物和检测引物，如SEQ IDNO：1～9所示。一种检测结直肠癌血清miR-128的专用试剂盒，包括上述引物，以及RNA分离液。一种检测结直肠癌血清miR-128表达量的方法，步骤如下：（1）将待检测的血清标本与等体积RNA分离液混合，16000g离心10分钟，分离上清液；（2）RT-PCR扩增；（3）制作标准曲线（4）计算：得出基因的校正起始拷贝数Q；将miR-128的Q值与内参基因U6、miR-16的Q值的几何平均数相比，得到miR-128的相对表达量。本发明的检测方法，为结直肠癌的早期发现、早期治疗提供了重要的参考依据。

主权项

一种检测结直肠癌血清miR‑128的专用引物，其特征在于：包括：（1）miR‑128的逆转录引物和检测引物，逆转录引物的序列如SEQ ID NO：1所示，检测引物的序列如SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3所示：miR‑128‑RT：5’‑GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACAAAGAG‑3’；miR‑128‑F：5’‑GGCTCACAGTGAACCGGT‑3’；miR‑128‑R：5’‑GTGCAGGGTCCGAGGT‑3’；（2）U6的逆转录引物和检测引物，逆转录引物的序列如SEQ ID NO：4所示，检测引物的序列如SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：6所示：U6‑RT：GTGCTCGCTTCGGCAGCACATATAC；U6‑F：GTGCTCGCTTCGGCAGCACATATAC；U6‑R：AAATATGGAACGCTTCACGAATT；（3）miRNA‑16的逆转录引物和检测引物，逆转录引物的序列如SEQ ID NO：7所示，检测引物的序列如SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：9所示：miRNA‑16‑RT：5’‑GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACCGCCAA‑3’；miRNA‑16‑F：5’‑CGCCTAGCAGCACGTAAATA‑3’；miRNA‑16‑R：5’‑GTGCAGGGTCCGAGGT‑3’。