[发明专利]通过补加低聚木糖调整发酵纤维素复合酶配比的方法

摘要

本发明公开了一种通过补加低聚木糖调整发酵纤维素复合酶配比的方法，利用低聚木糖抑制纤维素复合酶中外切葡聚糖酶活性的原理，促使在纤维素酶发酵中其刺激生物菌体分泌更多的内切酶和β葡萄糖苷酶，导致最终生成的纤维素酶整体酶活依然保持很高的水平下，β葡萄糖苷酶在纤维素复合酶中的比例得到较多提升；采用此方法发酵生产纤维素复合酶具有高比例的β葡萄糖苷酶，由传统发酵方法生产的β/FPA=0.3提高到1，比添加纯β葡萄糖苷酶调节比例的生产成本降低了30%以上，此方法操作简单，无需增加特别设备。

主权项

通过补加低聚木糖调整发酵纤维素复合酶配比的方法，其特征是：利用低聚木糖抑制纤维素复合酶中外切葡聚糖酶活性的原理，促使在纤维素酶发酵中其刺激生物菌体分泌更多的内切酶和β葡萄糖苷酶，导致最终生成的纤维素酶整体酶活依然保持很高的水平下，β葡萄糖苷酶在纤维素复合酶中的比例得到较多提升；包括以下具体步骤：（1）培养基配制：微晶纤维素30g/L，蛋白胨10g/L，(NH4)2SO4 5 g/L，KH2PO4 2 g/L，MgSO4·7H2O 0.3g/L，FeSO4·7H2O 5mg/L，ZnSO4·7H2O 1.4mg/L，MnSO4·7H2O 1.6mg/L配制培养基，于121℃灭菌20min，培养基在发酵罐中的装液量为发酵罐装液容量的60%~80%；（2）菌种培养：里氏木霉孢子液（~107CFU）按玉米浆培养基质量的5%的接种量接至5g/L玉米浆培养基中，30度摇床培养；（3）接种与产酶发酵：以培养基体积的1%~5%（v/v）的接种量接种培养24小时的里氏木霉种子液于发酵罐中发酵，发酵过程参数控制为：温度30℃，溶解氧不低于20%，通气量0.1~0.3vvm；（4）过程补料：在发酵培养48~96小时补加1~10g/L低聚木糖；（5）收集：结束发酵，收集发酵液用来制备纤维素酶。