[发明专利]棕色固氮菌PCR检测试剂盒有效
申请号: | 201310016882.6 | 申请日: | 2013-01-16 |
公开(公告)号: | CN103045750A | 公开(公告)日: | 2013-04-17 |
发明(设计)人: | 杨茂生;史开志;杨莉;徐景峨;吴位珩;梁应林 | 申请(专利权)人: | 贵州省畜牧兽医研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04 |
代理公司: | 贵阳中新专利商标事务所 52100 | 代理人: | 李亮;程新敏 |
地址: | 550005*** | 国省代码: | 贵州;52 |
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摘要: | 本发明公开了一种棕色固氮菌PCR检测试剂盒,它包括4.5ul质量百分比浓度为50%的甘油、1.0ul二甲基亚砜、2uldNTP,dNTP中的ATP,GTP,TTP及CTP均为2.5mol/L、2.0ul浓度为25mmol/LTris-HCl、2ul浓度为25mmol/L的MgCl2、0.5ul浓度为2U/ul的Taq酶、引物两条,均为1.0ul、11.0ul超纯水、2ulDL2000DNAMarker、2ul阳性对照及2ul阴性对照;每次PCR反应加入DNA模板0.5~1.5ul。本发明通过引物设计和模板制备建立针对棕色固氮菌固氮酶基因和藻酸盐algE,algJ,algC等基因的PCR方法,能有效提高棕色固氮菌地方株的检出率,使用效果好。 | ||
搜索关键词: | 棕色 固氮菌 pcr 检测 试剂盒 | ||
【主权项】:
一种棕色固氮菌PCR检测试剂盒,其特征在于:它包括4.5ul 质量百分比浓度为50%的甘油、1.0ul二甲基亚砜、2ul dNTP,dNTP中的ATP,GTP,TTP及CTP均为2.5mol/ L、2.0ul浓度为25 mmol/ L Tris‑HCl、2ul浓度为25mmol/ L的MgCl2、0.5ul浓度为2U/ul的Taq酶、引物两条,均为1.0ul、11.0ul超纯水、2ul DL2000 DNA Marker、2ul阳性对照及2ul阴性对照;每次PCR反应加入DNA模板0.5~1.5ul;其中引物包括上游引物及下游引物,上游引物的序列为5’‑GACCTTGCCGCTGGTGTTG‑3’,下游引物的序列为5’‑CGCCGAGCAGTTCGTTTT‑3’。
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