[发明专利]基于MP基因的黄瓜绿斑驳花叶病毒实时荧光PCR检测方法及探针和引物组合无效

专利信息
申请号: 201310026978.0 申请日: 2013-01-25
公开(公告)号: CN103060476A 公开(公告)日: 2013-04-24
发明(设计)人: 张卫东;廖力;王岚;梁玉英;权永兵;迟远丽;徐淼锋 申请(专利权)人: 张卫东;廖力;王岚;梁玉英;权永兵;迟远丽;徐淼锋
主分类号: C12Q1/70 分类号: C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/94
代理公司: 广州市红荔专利代理有限公司 44214 代理人: 王贤义
地址: 519015 广东省珠*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明公开了一种基于运动蛋白基因(MovementProtein,MP)的黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumbergreenmottlemoasicvirus,CGMMV)快速分子鉴定的PCR检测方法及在该方法中应用到的引物和探针组合。本发明采用的引物和探针序列分别为上游引物MMV-F1、下游引物MMV-R1和荧光探针MMV-1;本发明方法包括以下步骤:(1)取待测样品提取植物组织总RNA,(2)以总RNA为模板,引入所述下游引物MMV-R1进行反转录模板cDNA的合成,(3)将所述上、下游引物和所述荧光探针置于荧光PCR仪中进行实时荧光PCR扩增反应,(4)反应结束后,通过收集的荧光曲线CT值与标准曲线CT值比较,判断检测结果。本发明可应用于生物物种分子诊断领域。
搜索关键词: 基于 mp 基因 黄瓜 斑驳 花叶 病毒 实时 荧光 pcr 检测 方法 探针 引物 组合
【主权项】:
一种基于MP基因的黄瓜绿斑驳花叶病毒实时荧光PCR检测用探针和引物组合,其特征在于,它包括上游引物MMV‑F1、下游引物MMV‑R1和荧光探针MMV‑1,其序列分别如下:MMV‑F1:5’‑ CACCTTTATGTCACATTGTTG‑3’;MMV‑R1:5’‑ GAATGCATCCTTGTGTCAAC ‑3’;MMV‑1:5’‑FAM‑CTACAGGATTCCGGTACGTTCCAT‑TAMRA‑3’。
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