[发明专利]一种在发酵过程中测定免疫球蛋白的糖基化和末端修饰情况的方法有效
| 申请号： | 201310027666.1 | 申请日： | 2013-01-15 |
| 公开（公告）号： | CN103217490A | 公开（公告）日： | 2013-07-24 |
| 发明（设计）人： | 朱保国;彭育才;杨嘉明 | 申请（专利权）人： | 珠海市丽珠单抗生物技术有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02 |
| 代理公司： | 北京泛华伟业知识产权代理有限公司 11280 | 代理人： | 刘丹妮 |
| 地址： | 519020 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供一种测定免疫球蛋白发酵液样品的糖基化和末端修饰情况的方法，该方法能够同时、快速地对免疫球蛋白糖基化、N端焦谷氨酸化和C端脱赖氨酸进行测定，所述方法包括以下步骤：1)使用亲和色谱(Protein A)初步纯化免疫球蛋白，并使用超滤离心装置浓缩样品；2)使步骤1)中浓缩后的免疫球蛋白经变性剂变性后，使用还原剂还原，从而拆分轻链和重链；3)使用反相超高压液相色谱分离步骤2)中免疫球蛋白的轻链和重链；4)使用质谱测定步骤3)中获得的轻链和重链的分子量；以及5)分析步骤3)中的色谱数据和步骤4)中的质谱数据，从而测定所述免疫球蛋白的糖基化和末端修饰情况。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 发酵 过程 测定 免疫球蛋白 糖基化 末端 修饰 情况 方法 | ||
【主权项】：
一种同时测定免疫球蛋白发酵液样品的糖基化和末端修饰情况的方法，所述方法包括以下步骤：1)使用亲和色谱(Protein A)初步纯化免疫球蛋白，并使用超滤离心装置浓缩样品；2)使步骤1)中浓缩后的免疫球蛋白经变性剂变性后，使用还原剂还原，从而拆分轻链和重链；3)使用反相超高压液相色谱分离步骤2)中免疫球蛋白的轻链和重链；4)使用质谱测定步骤3)中获得的轻链和重链的分子量；以及5)分析步骤3)中的色谱数据和步骤4)中的质谱数据，从而测定所述免疫球蛋白的糖基化和末端修饰情况。
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