[发明专利]一种高通量筛选耐盐植物的方法及装置无效
申请号: | 201310043178.X | 申请日: | 2013-02-04 |
公开(公告)号: | CN103120125A | 公开(公告)日: | 2013-05-29 |
发明(设计)人: | 陈集双;贾明良;张本厚;欧阳平凯;金磊磊 | 申请(专利权)人: | 南京工业大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00;A01H1/04 |
代理公司: | 南京正联知识产权代理有限公司 32243 | 代理人: | 王素琴 |
地址: | 210009 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种高通量筛选耐盐植物的方法及装置,通过在植物生物反应器中大批量培养筛选材料,在同一装置中方便地提供和更换盐胁迫条件并进行培养筛选,从大量植物群体中获得具有耐盐性的植物变异体并扩繁,包括以下步骤:1)植物体批量获得;2)耐盐植株的筛选;3)耐盐株系的规模扩繁。本发明涉及到装置的分体式的设计,即装置的储液罐为可拆卸连接的,实现不同培养液的更换。本发明的方法及装置提供了一种实现植物抗盐筛选和后续培养的连续操作,大大减小工作量以及极大的提高筛选和进一步扩繁的效率。 | ||
搜索关键词: | 一种 通量 筛选 植物 方法 装置 | ||
【主权项】:
一种高通量筛选耐盐植物的方法,其特征在于:通过在植物培养反应器装置中大批量培养筛选材料,在同一装置中方便地提供和更换盐胁迫条件并进行培养筛选,从大量植物群体中获得具有耐盐性的植物变异体并扩繁,以获得具有耐盐性的植物,具体包括以下步骤: (1)植物体批量获得:将植物体处理后接种入植物培养反应器装置中进行培养参数设定后,进行规模化培养,根据需要进行下一步的操作; 其中所述的培养参数包括培养基、培养基pH、浸没频率、接种密度、培养条件和培养时间; 培养基为根据植物种类的不同进行不同培养基的确定及激素种类及浓度的选择,包含现有的培养基类型及通过改良后的培养基类型; 培养基pH为用于培养扩繁的pH为植物适宜生长的范围为5.0~7.0; 浸没频率可以根据植物种类不同调整不同的浸没频率,范围为1min/24h~24h/24h; 接种密度的范围为3 ~600个/L; 培养条件为光照强度1000~50000lux,光照时间5~20 h/d,培养温度25±1℃; 培养时间依据不同植物生长状态来确定,一般生长时间为10~90d,以植物体长满培养容器为宜,期间培养液的消耗可以通过装置中方便拆卸组装的储液罐结构来进行更新或补充; (2)耐盐植株的筛选:通过植物培养反应器装置分体式的设计将培养液更换为0.5%的EMS溶液,将获得的植株经0.5%的EMS诱变剂处理诱变3小时后,再进行培养液的更换,在培养液中设置一定的盐浓度和梯度,培养筛选以获得具有抗盐特征的植物株系,其中盐是指氯化钠作为胁迫元素,浓度为0.1%~3.0%; (3)抗盐株系的规模扩繁:在同一装置中对筛选后得到的抗盐株系,通过一定的培养条件,尤其是盐浓度下进行进一步的抗盐植株稳定性筛选和规模化扩繁,所述一定的培养条件是指培养的环境既可以是具有一定盐浓度存在的的培养条件,也可以是不含盐的培养条件,所述一定盐浓度存在的情况为盐浓度为0.1%~3.0%。
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