[发明专利]一种控制鱼类生殖的方法

摘要

本发明公开了一种控制鱼类生殖的方法，其步骤：A，构建重组基因CMV-eGFP-SV40-CMV-Gal4-SV40，建立转GAL4基因斑马鱼家系；B，构建重组基因CMV-RFP-SV40-UAS-antisensednd，建立转uas-antisensednd基因斑马鱼家系；C，以两个家系的转基因鱼纯合子为亲本杂交，杂交后代鱼生殖败育。本发明通过两系可育而杂交子代诱导不育的策略，建立了一种具有普遍意义的控制鱼类育性的新方法。该方法解决了生殖操作研究中鱼的不育性与性状的可遗传性间的矛盾，能有效运用于鱼类新品种培育和种群控制。

主权项

一种控制鱼类生殖的方法，其步骤是：（1）外源基因导入：采用显微注射法将重组基因CMV‑eGFP‑SV40‑CMV‑Gal4‑SV40和CMV‑RFP‑SV40‑UAS‑antisense dnd分别导入斑马鱼受精卵中，得到P0代转GAL4基因斑马鱼和转UAS‑antisense dnd基因斑马鱼；所述的重组基因CMV‑eGFP‑SV40‑CMV‑Gal4‑SV40，其序列为SEQ ID NO.1所示；所述的重组基因CMV‑RFP‑SV40‑UAS‑antisense dnd，其序列为SEQ ID NO.2所示；（2）获得转基因鱼纯合子：表达绿色荧光蛋白的为P0代转GAL4基因斑马鱼；表达红色荧光蛋白的为P0代转UAS‑antisense dnd基因斑马鱼；将两种P0代转基因斑马鱼分别与对照斑马鱼杂交，分别获得F1代转GAL4基因斑马鱼和转UAS‑antisense dnd基因斑马鱼；将F1代转基因GAL4斑马鱼自交，在F2代中获得转GAL4基因斑马鱼纯合子；将F1代转UAS‑antisense dnd基因斑马鱼自交，在F2代中获得转UAS‑antisense dnd基因斑马鱼纯合子；（3）转基因鱼杂交：以转GAL4基因斑马鱼纯合子和转UAS‑antisense dnd基因斑马鱼纯合子为亲本，进行两个家系的转基因鱼杂交，两个家系杂交产生的后代鱼生殖败育。