[发明专利]一种裂解时自动降解核酸的大肠杆菌制备的方法有效
| 申请号： | 201310052355.0 | 申请日： | 2013-02-18 |
| 公开（公告）号： | CN103205448A | 公开（公告）日： | 2013-07-17 |
| 发明（设计）人： | 徐东;任昌义 | 申请（专利权）人： | 深圳市亚太兴实业有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19;C12R1/445 |
| 代理公司： | 深圳中一专利商标事务所 44237 | 代理人： | 张全文 |
| 地址： | 518103 广东省深圳*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明适用于生物技术领域，提供了一种裂解时自动降解核酸的大肠杆菌制备方法，包括：将pelB信号肽序列与SNase序列连接，得第一组合序列，将该第一组合序列与Km基因序列连接，得到第二组合序列；用该第二组合序列替换大肠杆菌的ptsG基因序列，获得ptsG基因缺失的大肠杆菌；将该ptsG基因缺失的大肠杆菌中的第二组合序列中的Km基因敲除。本发明的大肠杆菌制备方法具有同源重组效率高的优点，且制得的大肠杆菌表达的SNase可分泌至周质空间，且SNase基因表达的产物不会影响其它目的蛋白的表达，能降低发酵过程中乙酸的积累，促进菌体生长。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 裂解 自动 降解 核酸 大肠杆菌 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种裂解时自动降解核酸的大肠杆菌制备方法，该方法包括以下步骤：将pelB信号肽编码序列与金黄色葡萄球菌核酸酶基因序列连接，得第一组合序列，其中所述pelB信号肽编码序列在所述金黄色葡萄球菌核酸酶基因序列上游；将所述第一组合序列与卡那霉素抗性基因序列连接，得到第二组合序列，其中所述第一组合序列在所述卡那霉素抗性基因序列上游；用所述第二组合序列替换大肠杆菌JM109的ptsG基因序列，获得ptsG基因缺失的大肠杆菌JM109；将所述ptsG基因缺失的大肠杆菌JM109的第二组合序列中的卡那霉素抗性基因敲除。
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