[发明专利]用于同时检测牛传染性鼻气管炎病毒和赤羽病毒的多重PCR引物及其设计方法有效
| 申请号： | 201310071885.X | 申请日： | 2013-03-06 |
| 公开（公告）号： | CN103160615A | 公开（公告）日： | 2013-06-19 |
| 发明（设计）人： | 孔繁德;徐淑菲;陈圣军;张吉红;唐泰山;陈信忠;龚艳清;郭书林;杨俊萍 | 申请（专利权）人： | 厦门出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12N15/10;C12R1/93 |
| 代理公司： | 厦门南强之路专利事务所 35200 | 代理人： | 马应森 |
| 地址： | 361026 福建*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 用于同时检测牛传染性鼻气管炎病毒和赤羽病毒的多重PCR引物及其设计方法，涉及牛传染性鼻气管炎病毒和赤羽病毒的检测。多重PCR引物中的牛传染性鼻气管炎病毒引物对应的PCR扩增片段大小为311bp，赤羽病毒引物对应的PCR扩增片段大小为392bp。1）设计多重PCR引物组合；2）对引物组合中的引物进行筛选，保留不能合成引物二聚体的引物；3）判断所保留引物的竞争优劣状态，将所保留引物的GC%和碱基数进行比较，选取GC含量高的判断为竞争状态优势引物，进行步骤5）；否则进行步骤4）；4）再次筛选竞争状态劣的引物，具体为重复步骤2），对所保留的引物按步骤3）再次判断；5）对竞争状态优引物进行扩增。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 同时 检测 传染性 气管炎 病毒 多重 pcr 引物 及其 设计 方法 | ||
【主权项】：
用于同时检测牛传染性鼻气管炎病毒和赤羽病毒的多重PCR引物，其特征在于其中，牛传染性鼻气管炎病毒引物对应的PCR扩增片段大小为311bp，赤羽病毒引物对应的PCR扩增片段大小为392bp，具体引物序列如下：IBRV F1：‑TGACGGTAGCCTGGGACTGG‑3’IBRV R1：5’‑CCGGAAGGCCACGACAAA‑3’AKAV F1：5’‑AGGGTATGTGGCATTTATCA‑3’AKAV R1：5’‑CCAGAAACATCTCAGCACC‑3’其中，IBRV为牛传染性鼻气管炎病毒的英文缩写，AKAV为赤羽病毒的英文缩写；IBRV F1和IBRV R1为根据牛传染性鼻气管炎病毒gB基因设计的上游引物F1和下游引物R1；AKAV F1和AKAV R1为根据赤羽病毒S基因设计的上游引物F1和下游引物R1。
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