[发明专利]一种同时检测多种黄曲霉毒素传感器的制备方法及应用

摘要

本发明公开了一种同时检测多种黄曲霉毒素印刷电极电化学免疫传感器的制备方法和应用，属于生物传感、纳米功能材料及食品安全分析技术领域。本发明是在涂覆一层聚酯薄膜的矩形基片表面上印刷7个电极，其中包括5个碳工作电极，1个银参比电极和1个对电极，7个电极引出线及引出线端部。其特征在于，用银纳米粒子—氮掺杂石墨烯—羟丙基壳聚糖导电复合纳米材料将黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2以及总黄曲霉毒素的抗体固定到各工作电极表面，滴涂检测液后与多通道电化学工作站检测电路相连，从而实现了五种黄曲霉毒素的同时检测。本发明制备简单、加工方便、成本低、便于携带。该检测方法简单、快速、灵敏度高、特异性好。

主权项

一种同时检测多种黄曲霉毒素传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）在一个涂覆一层聚酯薄膜的矩形基片（①）表面上，依次以银浆印刷1个参比电极（②），以导电碳浆印刷5个工作电极（③）、1个对电极（④）、7个电极引出线（⑤）及引出线端部（⑥），并在所有电极及电极引出线端部以外的基片上，以绝缘浆印刷一层绝缘层，并在电极区域形成一个圆形电解池凹槽（⑦），制得五通道丝网印刷电极；（2）在（1）所述的五通道丝网印刷电极的5个工作电极上，滴涂5 ~ 10µL银纳米粒子—氮掺杂石墨烯—羟丙基壳聚糖构成的导电复合纳米材料溶液；所述导电复合纳米材料溶液，其特征是，将银纳米粒子和氮掺杂石墨烯一定的质量比进行混合超声分散30min，然后加上质量分数1.0%的羟丙基壳聚糖溶液超声混合30min，制成质量比为（1 ~ 5）:（8 ~ 12）:（1~ 10）的银纳米粒子—氮掺杂石墨烯—羟丙基壳聚糖导电复合纳米材料溶液；（3）在步骤（2）制得的5个工作电极上分别滴加5 ~ 10µL的黄曲霉毒素B1抗体、黄曲霉毒素B2抗体、黄曲霉毒素G1抗体、黄曲霉毒素G2抗体及总黄曲霉毒素抗体，再以10µL、质量分数为1%的牛血清白蛋白封闭电极上的非特异性活性位点，制得一种同时检测多种黄曲霉毒素传感器，置于4 ℃下保存备用，所述抗体浓度均5 ~ 10 µg/mL。