[发明专利]一种共分离制备鸡蛋清溶菌酶与活性蛋白的方法有效
申请号: | 201310080459.2 | 申请日: | 2013-03-14 |
公开(公告)号: | CN103160482A | 公开(公告)日: | 2013-06-19 |
发明(设计)人: | 闻崇炜;宁德刚;徐卫东 | 申请(专利权)人: | 江苏大学 |
主分类号: | C12N9/36 | 分类号: | C12N9/36;C07K14/77;C07K14/79;C07K1/34;C07K1/30 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 楼高潮 |
地址: | 212013 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种共分离制备鸡蛋清溶菌酶与活性蛋白的方法,步骤如下:在室温下收集鸡蛋清,并调节pH至5.5左右,搅拌均匀后离心;向离心后得到的上清液中加入分子量介于200-20000的聚乙二醇,搅拌均匀后离心;向离心后得到的上清液中加入饱和硫酸铵溶液,混匀后离心;分别收集离心得到的上层清液和下层清液;对上层清液进行超滤或者透析处理可以得到高纯度的鸡蛋清溶菌酶;对下层清液进行超滤或者透析处理可以得到卵白蛋白与卵转铁蛋白为主的较高纯度的其它活性蛋白。本发明简单易行,成本低廉,条件温和,可以很好地保持溶菌酶品质,适用于大规模工业化生产,同时还可以得到其它活性蛋白,进一步提高生产效益。 | ||
搜索关键词: | 一种 分离 制备 鸡蛋 清溶菌酶 活性 蛋白 方法 | ||
【主权项】:
一种共分离制备鸡蛋清溶菌酶与活性蛋白的方法,按照下述步骤进行:(1)室温下取新鲜鸡蛋,收集鸡蛋清,按照鸡蛋清与新鲜去离子水体积比为1:2的比例进行稀释,随后用1M盐酸调至pH 5.5左右,均匀搅拌1小时,8000rpm离心去除沉淀,收集上清液A;(2)向所得上清液A中加入分子量介于200‑20000的聚乙二醇,至聚乙二醇的质量浓度达10‑30%,再搅拌1小时,8000rpm离心,收集上清液B;(3)向所得上清液B中加入饱和硫酸铵溶液,至硫酸铵的质量浓度达到15%,混匀后于6000rpm离心,分别收集上层清液C与下层清液D;(4)对所得上层清液C,以膜截留分子量为3000‑5000Da的超滤膜进行超滤,或者进行透析处理,对超滤或者透析处理所得溶液进行真空冷冻干燥,得到白色粉末,即为溶菌酶;(5)对所得下层清液D,以膜截留分子量为3000‑5000Da的超滤膜进行超滤,或者进行透析处理,对超滤或者透析处理所得溶液进行真空冷冻干燥,得到白色粉末,即为卵白蛋白与卵转铁蛋白为主的较高纯度的其它活性蛋白。
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