[发明专利]黄瓜高分辨率染色体荧光原位杂交的方法无效
| 申请号： | 201310081001.9 | 申请日： | 2013-03-14 |
| 公开（公告）号： | CN103114151A | 公开（公告）日： | 2013-05-22 |
| 发明（设计）人： | 娄群峰;何玉华;陈劲枫;程春燕;张云霞;李季 | 申请（专利权）人： | 南京农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;G01N21/64 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 210095 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种荧光原位杂交的方法，以黄瓜减数分裂粗线期染色体为靶DNA进行多探针的荧光原位杂交。精选染色体分散良好且形态结构清晰的高质量制片，在80℃的70％去离子甲酰胺中变性，梯度酒精中脱水干燥；采用碱裂解法提取目标质粒DNA，利用缺刻平移法进行标记，配制杂交混合液，90℃变性后，加到载玻片上使靶DNA与探针进行杂交，最后进行信号检测。本发明的荧光原位杂交技术，可用于黄瓜染色体物理图谱的绘制，由于其一次性可加入多个探针，避免了对一张制片多次重复杂交，大大提高了实验效率。本发明在配置杂交混合液的过程中加入了适量的黄瓜全基因组DNA和Cot-1DNA，用于封阻杂信号和重复序列信号，提高了靶信号的辨识率，增加了实验结果的准确性。 | ||
| 搜索关键词： | 黄瓜 高分辨率 染色体 荧光 原位杂交 方法 | ||
【主权项】：
黄瓜高分辨率染色体荧光原位杂交是基于减数分裂粗线期染色体进行，其特征在于：得到了能清晰分辨出多达10个探针的高分辨率粗线期染色体荧光原位杂交的方法，大大提高了靶信号的辨识率。
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