[发明专利]一种检测5-羟甲基脱氧尿苷的化学方法无效
申请号: | 201310082540.4 | 申请日: | 2013-03-15 |
公开(公告)号: | CN103175827A | 公开(公告)日: | 2013-06-26 |
发明(设计)人: | 周翔;徐小为;翁小城 | 申请(专利权)人: | 武汉大学 |
主分类号: | G01N21/76 | 分类号: | G01N21/76;G01N21/64 |
代理公司: | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人: | 张火春 |
地址: | 430072 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种检测5-羟甲基脱氧尿苷的化学方法,即5-羟甲基脱氧尿苷通过一步反应变成叠氮化的脱氧尿苷,然后用一个带炔基的没有荧光的探针与它反应,反应后的物质有很强的荧光,从而达到荧光从无到有的效果,进而检测出脱氧胸苷氧化突变的存在。该方法可以高效、灵敏、选择性强的检测5-羟甲基脱氧尿苷。 | ||
搜索关键词: | 一种 检测 甲基 脱氧 化学 方法 | ||
【主权项】:
一种检测5‑羟甲基脱氧尿苷的化学方法,其特征在于,包括以下步骤:1)配制5‑羟甲基脱氧尿苷的二甲亚砜溶液和叠氮化钠的三氟乙酸溶液,混合上述溶液,混合溶液中5‑羟甲基脱氧尿苷与叠氮化钠的摩尔比为1:490,反应后除去三氟乙酸,反应时间≥24小时,得到叠氮取代的5‑羟甲基脱氧尿苷; 2)配制7‑炔基香豆素的二甲亚砜溶液;3)向步骤1)得到的叠氮取代的5‑羟甲基脱氧尿苷中加入水与N,N‑二甲基甲酰胺,N,N‑二甲基甲酰胺与水的比例为1:1,再加入步骤2)配制好的7‑炔基香豆素的二甲亚砜溶液、五水合硫酸铜和抗坏血酸钠,7‑炔基香豆素与叠氮化的5‑羟甲基脱氧尿苷的摩尔比为1:1,室温下搅拌16~24小时后,用荧光仪检测5‑羟甲基脱氧尿苷。
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