[发明专利]一种采用消化法消化提取细胞流式检测组织内细胞凋亡率的方法无效
| 申请号： | 201310086308.8 | 申请日： | 2013-03-18 |
| 公开（公告）号： | CN103217522A | 公开（公告）日： | 2013-07-24 |
| 发明（设计）人： | 王海强;刘志恒;李新奎;李昂;高扬;孙振;陈宇飞;张威林;张泳照;万中元 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第四军医大学 |
| 主分类号： | G01N33/53 | 分类号： | G01N33/53;G01N1/28 |
| 代理公司： | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人： | 陆万寿 |
| 地址： | 710032 *** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 一种采用消化法消化提取细胞流式检测组织内细胞凋亡率的方法，将收集的组织在无菌条件下分离，置于胰蛋白酶中消化后离心，弃去上清液，于室温下用Ⅱ型胶原酶静止消化后离心，弃去上清液，并加入PBS溶液，将细胞吹打分散后加入离心管，离心并吸出上清液，随后再加入PBS溶液吹打细胞，得到消化的目的细胞；将消化的目的细胞制成每100μl单细胞悬液细胞密度1×106个细胞的溶液，使用Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒，通过Annexin V抗体与磷脂丝氨酸的特异性结合来检测细胞凋亡。本发明消化法提取细胞流式检测组织内细胞凋亡率，为目前凋亡相关的实验研究提供了一种准确、定量及可靠的检测方法。采用此检测方法。检测结果与课题设计高度符合，结果精准可靠。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 采用 消化 提取 细胞 检测 组织 凋亡率 方法 | ||
【主权项】：
一种采用消化法消化提取细胞流式检测组织内细胞凋亡率的方法，其特征在于：1）目的组织的酶消化法收集细胞将收集的组织在无菌条件下分离，剪成碎块，于室温下置于胰蛋白酶中消化后离心，弃去上清液，于室温下用Ⅱ型胶原酶静止消化后离心，弃去上清液，并加入PBS溶液，将细胞吹打分散后加入离心管，离心并吸出上清液，随后再加入PBS溶液吹打细胞，得到消化的目的细胞；2）Annexin V与PI双染与FCM检测将消化的目的细胞制成每100μl单细胞悬液细胞密度1×106个细胞的溶液，使用Annexin V‑FITC细胞凋亡检测试剂盒，通过Annexin V抗体与磷脂丝氨酸的特异性结合来检测细胞凋亡。
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