[发明专利]大熊猫雌二醇浓度值的快速检测方法无效
| 申请号： | 201310092471.5 | 申请日： | 2013-03-21 |
| 公开（公告）号： | CN103217384A | 公开（公告）日： | 2013-07-24 |
| 发明（设计）人： | 罗娌;侯蓉;张志和;黄河;王成东;兰景超;黄祥明 | 申请（专利权）人： | 成都大熊猫繁育研究基地 |
| 主分类号： | G01N21/17 | 分类号： | G01N21/17 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 610081 四川省*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种大熊猫雌二醇浓度值的快速检测方法，在尿样检测结果没有差异的前提下，通过将传统室温下孵育2小时改变为37℃孵育0.5小时，使得大熊猫雌二醇浓度值的全部检测过程由原来的5小时缩短到2小时，检测时间缩短了60%，为适时自然交配和人工授精争取了宝贵的时间。 | ||
| 搜索关键词： | 大熊猫 雌二醇 浓度 快速 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种大熊猫雌二醇浓度值的快速检测方法，包括以下步骤：（1）对雌性大熊猫进行尿样收集，在尿样上标记后进行冷冻或冷藏保存；（2）用雌激素抗体R522‑2将96孔酶标板包被6～48小时；（3）将雌激素标准品和尿样稀释后，分别按顺序依次加入到已经包被好的96孔酶标板孔中；在96孔酶标板孔中加入Horseradish peroxidase溶液，在37℃下孵育0.5小时后，用洗液洗涤96孔酶标板；（4）将H2O2和ABTS加入到柠檬酸底液中，混合均匀成显色溶液；（5）往洗涤后的96孔酶标板孔中加入已配制好的显色溶液,室温下孵育30～60分钟后用酶标仪读取光吸收值，所得数值为该大熊猫雌二醇值；（6）将尿样和肌酐标准品稀稀释后分别按顺序依次加入到96孔酶标板中，再在96孔酶标板孔中加入NaOH和苦味酸，在室温下孵育10～20分钟后，用酶标仪检测光密度值，所得数值为该大熊猫尿样肌酐值；（7）用测到的该大熊猫雌二醇值除以该大熊猫肌酐值，所得结果为该大熊猫雌二醇浓度值。
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