[发明专利]一种青龙衣抗氧化活性提取物的高效液相色谱指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱和用途

摘要

一种青龙衣抗氧化活性提取物的高效液相色谱指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱和用途，它涉及一种青龙衣抗氧化活性提取物的高效液相色谱指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱和用途。本发明方法为：一、制备供试品溶液；二、制作指纹图谱，将供试品溶液注入高效液相色谱仪；本发明青龙衣抗氧化活性提取物的指纹图谱有4个共有特征峰，这些共有特征峰构成了青龙衣抗氧化活性提取物的指纹特征，可作为青龙衣抗氧化活性提取物的标准指纹图谱。本发明青龙衣抗氧化活性提取物标准指纹图谱的用途是指青龙衣抗氧化活性提取物指纹图谱作为标准指纹图谱用于青龙衣质量控制中。本发明应用于医药领域。

主权项

一种青龙衣抗氧化活性提取物的高效液相色谱指纹图谱的建立方法，其特征在于青龙衣抗氧化活性提取物的高效液相色谱指纹图谱的建立方法是按以下步骤进行：一、供试品溶液的制备：a、取青龙衣药材，加10倍质量的质量百分含量为95％乙醇，浸泡72h，过滤，分别收集固相物A和液相物A，将固相物A加入10倍质量的质量百分含量为95％乙醇中浸泡48h，过滤，分别收集固相物B和液相物B，将固相物B加入10倍质量的质量百分含量为95％乙醇中浸泡24h，过滤，收集液相物C，然后将液相物A、B和C混合，得到浸提液；b、将浸提液减压浓缩至相对密度为1.10～1.14，得到浓缩液，再将浓缩液和水按体积比1∶1混合，然后用质量百分含量为10％的盐酸调节pH值至2，得到稀释后的浓缩液；c、用与稀释后的浓缩液等体积的乙酸乙酯溶液对稀释后的浓缩液进行萃取，收集有机相，重复萃取2次，然后合并有机相，再减压浓缩至干，得到干燥的固体为青龙衣抗氧化活性提取物；d、将步骤c得到的青龙衣抗氧化活性提取物，用甲醇溶解成浓度为1mg/mL的溶液，用微孔滤膜进行过滤，滤液即为供试品溶液；二、指纹图谱的制作：将步骤一得到的供试品溶液注入高效液相色谱仪，以甲醇为A相，质量百分含量为0.2％的磷酸水溶液为B相进行梯度洗脱；其中，高效液相色谱条件为：色谱柱填料Thermo C18，规格为250×4.6mm，5μm；柱温为35℃；流动相为A相甲醇和B相质量百分含量为0.2％磷酸水溶液，流速0.8mL/min，检测波长250nm，进样量20μL；在此条件下分析供试品溶液，得到青龙衣抗氧化活性提取物的指纹图谱。