[发明专利]Line-1基因甲基化定量检测方法

摘要

本发明公开了一种Line-1基因甲基化定量检测方法，具有如下步骤：①对待测样本进行处理，得到样本模板；②设计并合成Line-1基因甲基化引物和Line-1基因未甲基化引物；③分别用步骤②的甲基化引物和未甲基化引物对步骤①的样本模板进行PCR扩增反应，并分别得到相应的PCR扩增产物；④对分别对步骤③得到的PCR扩增产物进行处理，并分别得到相应的标准品模板；⑤分别对步骤①的样本模板以及步骤④的标准品模板进行实时荧光定量PCR检测，并计算出甲基化程度。本发明针对Line-1基因设计出了甲基化引物和未甲基化引物，这样可以利用MSP法和实时荧光定量PCR法对Line-1基因甲基化进行定性定量检测。

主权项

一种Line‑1基因甲基化定量检测方法，具有如下步骤：①对待测样本进行处理，得到样本模板；②设计并合成Line‑1基因甲基化引物和Line‑1基因未甲基化引物；③分别用步骤②的甲基化引物和未甲基化引物对步骤①的样本模板进行PCR扩增反应，并分别得到相应的PCR扩增产物；④分别对步骤③得到的PCR扩增产物进行处理，并分别得到相应的标准品模板；⑤分别对步骤①的样本模板以及步骤④的标准品模板进行实时荧光定量PCR检测，并计算出甲基化程度；其特征在于：步骤②中所述的Line‑1基因甲基化引物如下：Line‑1基因甲基化正向引物：CGCGAGTCGAAGTAGGGC；Line‑1基因甲基化反向引物：ACCCGATTTTCCAAATACGACCG；扩增片段长度为110bp；步骤②中所述的Line‑1基因未甲基化引物如下：Line‑1基因未甲基化正向引物：TGTGTGTGAGTTGAAGTAGGGT；Line‑1基因未甲基化反向引物：ACCCAATTTTCCAAATACAACCATCA；扩增片段长度为110bp。