[发明专利]一种地特胰岛素的纯化方法有效
| 申请号： | 201310107097.1 | 申请日： | 2013-03-29 |
| 公开（公告）号： | CN103145829A | 公开（公告）日： | 2013-06-12 |
| 发明（设计）人： | 李蕴波;杜家富;司建萍;褚杨杰;孙美禄 | 申请（专利权）人： | 江苏诺泰制药有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/62 | 分类号： | C07K14/62;C07K1/18 |
| 代理公司： | 南京众联专利代理有限公司 32206 | 代理人： | 刘喜莲 |
| 地址： | 222000 江苏省连云*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明一种地特胰岛素的纯化方法，其步骤如下：纯化采用酸性缓冲液平衡阳离子交换柱；并用前述酸性缓冲液或用同体系的稀酸将地特胰岛素溶液调节至pH值<5，得样品溶液；将样品溶液上到阳离子交换柱上，然后用平衡缓冲液冲洗阳离子交换柱；采用0.5-1.0M、pH值为2-4的酸性缓冲液线性梯度洗脱的方式将吸附在柱子上的各种物质依次洗脱下来，收集主峰即得目的产物地特胰岛素。本发明方法不但具有操作方便，上样量大，回收率高等优势，而且避免了传统纯化方法需要使用大量有机试剂和需要高压色谱系统的苛刻要求，做到了节省成本、经济环保，适合于工业化生产。 | ||
| 搜索关键词： | 种地 胰岛素 纯化 方法 | ||
【主权项】：
一种地特胰岛素的纯化方法，其特征在于：所述的原料是由去B30的重组人胰岛素和十四烷基脂肪酸‑N‑琥珀酰亚胺酯一步反应制得的地特胰岛素溶液；纯化采用离子交换层析方法进行，其步骤如下：（1）采用氯化钠浓度低于50mM、pH值为2‑4的酸性缓冲液平衡阳离子交换柱4.5‑5.5CV；并用前述酸性缓冲液或用同体系的稀酸将地特胰岛素溶液调节至pH值<5，得样品溶液；（2）将样品溶液上到阳离子交换柱上，此时十四烷基脂肪酸‑N‑琥珀酰亚胺酯不挂柱，会流穿出来，然后用平衡缓冲液冲洗阳离子交换柱2.5‑3.5CV；（3） 采用氯化钠浓度为0.5‑1.0M 、pH值为2‑4的酸性缓冲液线性梯度洗脱的方式将吸附在柱子上的各种物质依次洗脱下来，收集主峰即得目的产物地特胰岛素。
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