[发明专利]一种制备固定化脂肪酶的方法

摘要

本发明提供了一种制备固定化脂肪酶的方法。该方法，利用耦合固定化技术即吸附、交联及包埋三种结合的方法对脂肪酶进行固定化。耦合技术的应用，克服了吸附法带来的脂肪酶易脱落，循环利用率差的缺点，具备交联法的高结合力及包埋法的高酶活回收的优点，使得结合于载体的脂肪酶牢牢地固定化于载体，提高重复循环利用率及酶活性。本工艺制备的固定化酶用于酯化，转酯，酯水解，不但转化率可达到90%以上，反应时间缩短，重复利用率达到100次以上，酶活降低≤5%，具有工业应用的前景。

主权项

一种制备固定化脂肪酶的方法，其特征在于包括如下步骤：a)制备含脂肪酶、水溶性蛋白和糖类的液体介质A，其中按100g液体介质A来计脂肪酶：水溶性蛋白：糖类的比例为100000‑500000U:0‑0.2g：0.01‑0.5g；b)制备含交联剂的液体介质B，其中交联剂的质量百分含量为0.1‑1.5%；c)制备含包埋剂的液体介质C，其中包埋剂的质量百分含量为0.01‑0.1%；d)将液体介质A和液体介质B引入至经预处理的粒状多孔载体上，过滤除去液体，得固体产物；e)将液体介质C引入至d）的固体产物中，过滤除去液体，剩余物经干燥后得固定化脂肪酶；所述步骤d)中按质量比液体介质A：液体介质B：粒状多孔载体=8‑10:1:1，液体介质A和液体介质B的引入顺序为任意或同时；所述步骤e）中按质量比液体介质C：固体产物的=2‑5:1；所述液体介质A、液体介质B、液体介质C为水溶液。