[发明专利]致泻性大肠杆菌检测试剂盒及其检测分型方法有效
申请号: | 201310123546.1 | 申请日: | 2013-04-10 |
公开(公告)号: | CN103215358A | 公开(公告)日: | 2013-07-24 |
发明(设计)人: | 扈庆华;石晓路;李迎慧;林一曼;邱亚群;陈琼城;陈清凉;姜伊祥 | 申请(专利权)人: | 深圳市疾病预防控制中心 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/10;C12Q1/06;G01N21/64 |
代理公司: | 深圳中一专利商标事务所 44237 | 代理人: | 张全文 |
地址: | 518000 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明适用于分子生物学及微生物检测技术领域,提供一种致泻性大肠杆菌检测试剂盒及检测和分型方法,该检测试剂盒包括PCR缓冲液、MgCl2、dNTP、DNA聚合酶,还包括stp、sth、lt、aggR、eaeA、escV、stx1、stx2、ipaH基因的引物及探针SEQ ID NO:1-SEQ ID NO:27,还包括序列为SEQ ID NO:28的Homo-tag。该检测和分型方法包括以下步骤:获得并处理样品,加入至检测试剂盒中;进行荧光定量PCR反应;获得检测结果。本发明的检测和分型方法特异性好,灵敏度高,操作简便,结果易于判读,适用于对致泻性大肠杆菌的快速筛查和分型。 | ||
搜索关键词: | 致泻性 大肠杆菌 检测 试剂盒 及其 方法 | ||
【主权项】:
一种致泻性大肠杆菌检测试剂盒,包括PCR反应缓冲液、MgCl2、dNTP、DNA聚合酶,其特征在于,还包括以下9组引物和探针:针对stp基因的引物对SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2以及探针SEQ ID NO:3,针对sth基因的引物对SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5以及探针SEQ ID NO:6,针对lt基因的引物对SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8以及探针SEQ ID NO:9,针对aggR基因的引物对SEQ ID NO:10和SEQ ID NO:11以及探针SEQ ID NO:12,针对eaeA基因的引物对SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14以及探针SEQ ID NO:15,针对escV基因的引物对SEQ ID NO:16和SEQ ID NO:17以及探针SEQ ID NO:18,针对stx1基因的引物对SEQ ID NO:19和SEQ ID NO:20以及探针SEQ ID NO:21,针对stx2基因的引物对SEQ ID NO:22和SEQ ID NO:23以及探针SEQ ID NO:24,针对ipaH基因的引物对SEQ ID NO:25和SEQ ID NO:26以及探针SEQ ID NO:27,其中各条所述探针5’端连接有荧光基团,3’端连接有淬灭基团;该检测试剂盒还包括序列为SEQ ID NO:28的Homo‑tag。
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