[发明专利]一种复合酶解羊乳酪蛋白制备ACE抑制肽的方法

摘要

一种复合酶解羊乳酪蛋白制备ACE抑制肽的方法，它以复原羊乳为原料，将其离心脱脂，并用等电点沉淀法制备酪蛋白，在特定的温度和PH条件下，将酪蛋白通过中性蛋白酶和胰蛋白酶进行复合水解，并对水解条件进行优化，用超声波对水解过程进行处理，得到的小分子ACE抑制肽并测定其活性，本发明制备的ACE抑制肽产品抑制比例达到80%以上，其分子质量小，在小肠内可以以完整肽段的形式被人体吸收，不会引起人体的免疫排斥反应，能够对高血压患者产生显著的降压作用，且对血压正常的人无作用，具有用量小、无毒副作用、性质温和、生理功能强的特点。

主权项

一种复合酶解羊乳酪蛋白制备ACE抑制肽的方法，其特征在于，包括如下步骤： 步骤1：将羊奶粉与水按照质量比例1:9进行混合溶解，将得到的复原羊乳冷却到4℃，使用高速离心机在6400rpm下离心15min后，除去脂肪，得到脱脂乳； 步骤2：将所得脱脂乳在35‑75℃范围内的恒温水浴箱中进行保温，采用磁力加热搅拌器进行搅拌，搅拌速度为0‑1600rpm，边搅拌边滴加HCl溶液，使脱脂乳溶液的PH达到4.2‑5.0，酪蛋白进行沉淀，使用高速离心机在6400rpm下离心15min后，弃去上清液，将沉淀的酪蛋白进行冷冻干燥，在温度为‑40℃预冻12‑24h，再转移到冷冻干燥机在‑55℃下冷冻干燥24h，得到酪蛋白冻干粉，测定酪蛋白最大得率及条件； 步骤3：将上述步骤所得酪蛋白冻干粉制成质量浓度为10%的酪蛋白溶液100ml，放置恒温水浴箱内，调整温度在35‑55℃范围内，滴加1mol/lNaOH溶液，调节酪蛋白溶液PH在7.0‑9.0范围内； 步骤4：向酪蛋白溶液中加入质量比为1:1或1:2或2:1或4:1的中性蛋白酶和胰蛋白酶，所用的酶总量与酪蛋白溶液的质量比为2‑10：100，进行水解反应2‑5h，每间隔1h将5ml水解液在90℃水浴中保持10min使酶失活，使用高速离心机在9000rpm的条件下离心 20min，除去未水解的酪蛋白，收集上清液并采用紫外分光光度法测定ACE抑制活性，并对上清液进行冷冻干燥； 步骤5：在确定最佳水解条件的基础上，检测在不同超声功率（0、90、180、225w）条件下对水解反应的影响，测定ACE抑制活性。